大肠菌群检验纸片-Ⅲ

　　产品编号：060050

　　规　　格：10份/盒(9袋/份)

　　适用范围：广泛应用于食品、饮料饮用纯净水中的大肠菌群的检测。

　　检验方法：(参考GB 4789.3-2003)

　　样品处理：

　　以无菌操作将检样25ml(或25g)放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。固体样品最好用均质器，以8000～10000r/min的速度处理1min,做成1：10的均匀稀释液;用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，制成1：100的均匀稀释液;按上一步操作依次做10倍递增稀释液。

　　②　接 种：

　　根据食品卫生标准要求或对样本污染情况的估计，选择适宜稀释度的稀释液，吸取三份10 mL分别涂布于3袋大纸片;三份1 mL分别涂布于3袋小纸片;另取1 mL再稀释10倍后，吸取三份1 mL分别涂布于3袋小纸片。而后用手将检验纸片轻轻压平，袋口朝上竖直放置于恒温培养箱(35～37℃)内培养18～24h，然后观察结果。

　　③ 结果判断：

　　阴性结果：纸片保持紫蓝色不变，无论有否红色斑点或红晕均判为大肠菌群阴性。

　　阳性结果：纸片上呈现红色斑点或红晕，其周围变黄或整个纸片变黄均判为大肠菌群阳性。

　　④　结果报告：

　　根据阳性反应的纸片数查相应的大肠菌群MPN表，得数据乘以稀释倍数，以此为结果，报告每100mL(g)检样内大肠菌群的MPN值(见附表)

　　注意事项：

　　1、 应避光低温(10℃以下)保存，并注意防潮，如发现纸片变为粉红色即为失效。

　　2﹑ 检查食(饮)品时，凡酸性检样应以100g/L无菌碳酸钠溶液调pH至中性后，方可进行稀释接种。

　　3、 可疑结果的判断：

　　大肠菌群菌量的多少与结果的显示密切相关，可出现3种不同现象:(1) 菌量较大(≥103cfu/mL)，整个纸片变黄而又无红色斑点(或红晕);(2) 菌量适中(102~103 cfu/mL)，整个纸片也变黄，但有小而密集的红色斑点;(3) 菌量较少(≤102 cfu/mL)，纸片可呈紫蓝色，并有散在或较密集的红色斑点，其周围变黄。因此菌量较大时，可能出现可疑现象。此时应通过加大样品稀释度或进一步做复发酵进行证实。其它可疑现象也可通过复发酵实验进行确认。

　　4 、 确认试验的方法：

　　进行确认试验，用灭菌摄子无菌操作将可疑纸片移种到乳糖发酵管里，置37 ℃ 24小时培养后，对其产酸产气者判为大肠菌群阳性，否则判为阴性。

　　附表：

　　大肠菌群最可能数(MPN)检索表(总接种量33.3ml,其中3份10ml水样，3份1ml水样，3份0.1ml水样)