霍乱弧菌显色培养基

　　(Chromogenic Vibrio Cholerae Agar)

　　用 途：

　　霍乱弧菌显色培养基用于水产品及食物中毒样品中霍乱弧菌的分离和鉴定。

　　原 理：

　　蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;蔗糖为可发酵的糖类;抑菌剂抑制大部分非霍乱弧菌细菌，氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;色素与霍乱弧菌所具有的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上产生绿-蓝绿色的菌落。

　　霍乱弧菌显色培养基配方(每升)：

　　蛋白胨 15g

　　酵母膏粉 5g

　　蔗糖 10g

　　氯化钠 5g

　　抑菌剂 5g

　　琼脂 13g

　　色素 3.1g

　　最终pH 9.0±0.2

　　使用方法

　　1、取瓶内干粉56.1克，用100ml蒸馏水或纯水溶解，可按比例扩增或缩小。搅拌加热煮沸至完全溶解，不需高压灭菌，冷至约50℃，倾注灭菌平皿。

　　2、以无菌操作取检样25 g(mL)，加入碱性蛋白胨水225 mL，用旋转刀片式均质器以8 000 r/min均质1 min，或拍击式均质器拍击2 min，制备成1:10的均匀稀释液。如无均质器，则将样品放入无菌乳钵中磨碎，然后放在500 mL的灭菌容器内，加225 mL碱性蛋白胨水，并充分振荡。

　　3、增菌：将上述1:10稀释液于36 ℃±1 ℃培养6h～8h，如有需要可进行二次增菌。

　　4、分离

　　在增菌液中用接种环取一环，于霍乱弧菌显色平板上划线分离，于36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。

　　5、通过验证试验进一步确认假定性霍乱弧菌，如氧化酶、革兰氏染色等。

　　质量控制：

　　本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表:

　　注：最后的鉴定须做补充试验。

　　外观：

　　脱水培养基：浅黄色具流动性粉未。

　　制备好平板：淡黄色的胶。

　　储存条件和保质期：

　　脱水培养基：10-30℃，保质期二年。 制备好平板： 2-8℃，最多保存两周。

　　结果判断