大肠菌群显色培养基

　　(Chromogenic Coliform Agar)

　　用　　途：

　　大肠菌群显色培养基用于大肠菌群的快速检测和计数。

　　原 理：

　　蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌;显色底物与大肠菌群β-半乳萄糖苷酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上产生绿色的菌落。

　　配方(每升)：

蛋白胨	10g
酵母膏粉	3g
氯化钠	5g
十二烷基硫酸钠	0.1g
琼脂	12g
显色底物	2.7g
最终pH 7.0±0.2

　　大肠菌群显色培养基使用方法：

　　1、称取大肠菌群显色培养基32.8g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，无需高压灭菌。

　　2、以无菌手续取样品25g或25mL，加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内，充分振摇或用均质器均质1min成1：10稀释液，然后以1：10继续稀释，选择三个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种两个平皿。

　　3、采用倾注法：将培养基水浴冷却至约50℃，准备直径90mm已灭菌平皿，每个培养皿接种1ml样品，然后倾注约15ml上述溶解的培养基，混匀使其凝固，倒置，37℃培养24小时。

　　4、 采用表面接种法：冷却至约50℃，摇匀将培养基倾注于已灭菌平皿中。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光，4℃)。样品用划线接种法或滤膜法，37℃培养24小时。

　　5、观察结果。

　　质量控制：

　　本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后于36±1℃培养18～24h生长情况如下表。

菌    名	菌    号	生长状况	培养特征
大肠埃希氏菌	ATCC25922	良好	菌落绿色
柠檬酸杆菌	ATCC8090	良好	菌落绿色
鼠伤寒沙门氏菌	CMCC50115	良好	菌落无色
粪肠球菌	ATCC29212	受抑制	-

　　贮 存：贮存于10-30℃，避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。

 

　　规 格：可配置1L的培养基干粉。