改良月桂基硫酸盐胰蛋白月示肉汤(MLST)

　　(Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth)

　　用 途：

　　用于奶粉中阪崎肠杆菌的检验的增菌和分子生物学检验方法(PCR)选择性增菌(GB 4789.40-2010和SN1632.2-2005、ISO标准)。

　　原 理：

　　胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾是缓冲剂;月桂基硫酸钠和万古霉素可抑制革兰氏阳性细菌的生长。

　　培养基配方(每升)：

　　胰酪胨 20.0g

　　氯化钠 34.22g

　　乳糖 5.0g

　　磷酸二氢钾 2.75g

　　磷酸氢二钾 2.75g

　　月桂基硫酸钠 0.1g

　　最终pH6.8±0.2

　　使用方法：

　　1、称取本品64.8g，加入蒸馏水或去离子水1000.0mL，搅拌加热煮沸至完全溶解，121℃高压灭菌15min，待基础培养基冷至30℃时，每100.0ml培养基基础加入配套试剂1支(SR0180)(万古霉素10.0mg)，混合均匀。

　　2、取检样100g(或100ml)加入预热至44℃装有900ml缓冲蛋白胨水的锥形瓶中，用手缓缓地摇动至充分溶解，36℃±1℃培养18h±2h。移取1ml转接于10mlmLST-Vm 肉汤，44℃±0.5℃培养24h±2h。(GB标准)

　　3、取奶粉样品100.0克，加到已预热的(44℃)装有1000.0mMLST的2.0L三角瓶中，振摇使样品充分混匀后，在44±1℃恒温培养22～24小时。(SN和FDA方法)。

　　质量控制：

　　质控菌株接种后于44±1℃培养24小时结果如下：

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：250g

　　参考文献：

　　1.SN1632.2-2005 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品阪崎肠杆菌检验方法

　　2.GB/T4789.40-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验

　　3.GB 4789.40-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验

　　4 ISO22964-2006 Milk milk products-Detection of Enterobacter sakazakii