三糖铁琼脂培养基(TSI)

　　(Triple Sugar Iron Agar)

　　用 途：

　　三糖铁琼脂培养基用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应(《中华人民共和国药典》2010年版,)。

　　原 理：

　　胨、牛肉浸出粉提供氮源、维生素、矿物质;乳糖、葡萄糖、蔗糖为可发酵糖类，其产酸时通过酚磺酞指示剂测出，酸性呈黄色，碱性呈红色;硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢，与硫酸亚铁中的铁盐生成黑色硫化铁;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

　　三糖铁琼脂培养基配方(每升)：

　　胨 20.0g

　　牛肉浸出粉 5.0g

　　乳糖 10.0g

　　蔗糖 10.0g

　　葡萄糖 1.0g

　　氯化钠 5.0g

　　硫酸亚铁 0.2g

　　硫代硫酸钠 0.2g

　　琼脂 12.0g

　　0.2% 酚磺酞指示剂 12.5 ml

　　最终pH 7.3±0.1

　　使用方法：

　　1、称取本品63.4g，加入蒸馏水或去离子水1 L，加热搅拌溶解煮沸至完全溶解，分装试管(装量宜多些)。

　　2、将试管放入灭菌锅中，121℃高压灭菌15min，取出，制成高层斜面，备用。

　　3、挑取待检菌的新鲜纯培养物，穿刺接种后，再划斜面，置培养箱30～35℃培养18～24h。

　　4、观察结果。在三糖铁琼脂内只有斜面产酸并同时硫化氢阴性的菌株可以排除，其他的反应结果均有沙门氏菌的可能，同时也均有不是沙门氏菌的可能，对这些可疑菌需做进一步的生化试验。

　　质量控制：

　　下列菌株接种斜面后，30～35℃培养物18～24h，结果如下：

　　注：“A”为产酸，“K”为产碱。

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：250g

　　参考文献：

　　1. 《中华人民共和国药典》2010年版，附录XI J 微生物限度检查。