伊红美蓝琼脂(EMB)
(Eosin Methylene Blue Agar)
用 途:
伊红美蓝琼脂(EMB)用于分离革兰氏阴性肠道菌特别是大肠菌群和粪大肠菌群(GB/T4789.38-2008,GB15979-2002,SN0169-92,化妆品卫生规范2007版和GB5750.12-2006)。
原 理:
蛋白胨提供碳源和氮源;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;磷酸氢二钾是缓冲剂;琼脂是培养基凝固剂;伊红和美蓝是抑菌剂和pH指示剂,可抑制革兰氏阳性菌,在酸性条件下产生沉淀,形成紫黑色菌落或具黑色中心的外围无色透明的菌落。
配方(每升):
蛋白胨 10g
乳糖 10g
磷酸氢二钾 2g
琼脂 15g
伊红 0.4g
美蓝 0.065g
最终pH 7.1±0.2
使用方法:
1、称取伊红美蓝琼脂(EMB)37.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,充分溶解,121℃高压灭菌15min。
2、待培养基冷至50℃左右,以无菌手续,倾注灭菌平皿,待凝固后,备用。
3、将供试液划线接种于平板上。
4、将平板翻转,放入恒温培养箱中,36±1℃培养18—24h。
5、观察结果。
质量控制:
伊红美蓝琼脂(EMB)倾注平皿待冷却后呈紫色,可有细微沉淀。质控菌株接种后。36±1℃培养18—24h,观察结果如下表:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1. GB/T 4789 .38—2008 食品卫生微生物学检验标准 大肠杆菌计数。
2. GB15979-2002 中华人民共和国国家标准 一次性卫生用品卫生标准
3. SN0169-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中大肠菌群,粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法
4. 化妆品卫生规范 2007版 微生物检验
5. GB5750.12 -2006 中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验方法 微生物检验方法
6 ISO 21150-2006 CosmeticsMicrobiology- Detection of Escherichia coli
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