尿素琼脂培养基基础

　　(Urea Agar Base)

　　用 途：

　　尿素琼脂培养基基础用于鉴别肠道菌尿素酶试验 (GB4789.4-2010，《中华人民共和国药典》2010年版，SN0170-92和GB13091-91，ISO标准)。

　　原 理：

　　蛋白胨提供碳源和氮源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾是缓冲剂;具有尿素酶的细菌分解培养基中的尿素，产生大量的氨，使培养呈碱性，酚红指示剂在pH6.8时呈黄色，pH8.1呈粉红色;琼脂是培养基的凝固剂。

　　培养基配方(每升)：

　　蛋白胨 1g

　　氯化钠 5g

　　葡萄糖 1g

　　磷酸二氢钾 2g

　　酚红 0.012g

　　琼脂 15g

　　最终pH7.2±0.2

　　使用方法：

　　1、称取尿素琼脂培养基基础24g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，待冷却至50—55℃，每200mL培养基加入经过滤除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL，尿素的最终浓度为2%。分装无菌试管，制成斜面。

　　2、挑取待检菌的新鲜纯培养物，浓密地涂布在尿素琼脂斜面上，置36±1℃培养24h。

　　3、于2—4h及24h各观察一次结果。培养基呈现红色时为阳性反应，颜色不变者为阴性反应。如为阴性可继续培养观察至4d。

　　质量控制：

　　质控菌株接种后于36±1℃培养24h结果如下 ：

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：250g

　　参考文献：

　　1.GB/T4789.4-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

　　2.GB/T4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法，培养基和试剂

　　3.SN0170-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法

　　4.GB/T4789.4-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

　　5.GB 4789.4-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

　　6.GB 13091-91 中华人民共和国国家标准 饲料中沙门氏菌的检验方法

　　7. 《中华人民共和国药典》2010年版，附录XI J 微生物限度检查。

　　8.ISO 6579：2002 Microbiology of food animal feeding stuffs-Horizontal method for the detection of Salmonella spp.