三糖铁琼脂(TSI)

　　(Triple Sugar Iron Agar)

　　用 途：

　　三糖铁琼脂用于鉴别肠道菌发酵蔗糖、乳糖、葡萄糖及产生硫化氢的生化反应(GB/T4789.36-2008，GB4789.4-2010，SN0170-92 和GB13091-91，SN/T2206.1-2008)。

　　原 理：

　　蛋白胨、牛肉膏粉提供氮源、维生素、矿物质;乳糖、葡萄糖、蔗糖为可发酵糖类，其产酸时通过酚红指示剂测出，酸性呈黄色，碱性呈红色;硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢，与硫酸亚铁铵中的铁盐生成黑色硫化铁;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

　　三糖铁琼脂培养基配方(每升)：

　　蛋白胨 20g

　　牛肉膏粉 5g

　　乳糖 10g

　　蔗糖 10g

　　葡萄糖 1g

　　氯化钠 5g

　　硫酸亚铁铵 0.2g

　　硫代硫酸钠 0.2g

　　琼脂 12g

　　酚红 0.025g

　　最终pH 7.4±0.2

　　使用方法：

　　1、称取三糖铁琼脂63.4g，加入蒸馏水或去离子水1 L，加热搅拌溶解煮沸至完全溶解，分装试管(装量宜多些)。

　　2、将试管放入灭菌锅中，121℃高压灭菌15min，取出，制成高层斜面，备用。

　　3、挑取待检菌的新鲜纯培养物，穿刺接种后，再划斜面，置培养箱36±1℃培养18—24h。

　　4、观察结果。在三糖铁琼脂内只有斜面产酸并同时硫化氢阴性的菌株可以排除，其他的反应结果均有沙门氏菌的可能，同时也均有不是沙门氏菌的可能，对这些可疑菌需做进一步的生化试验。

　　质量控制：

　　下列菌株接种斜面后，36±1℃培养物18—24h，结果如下：

　　注：“A”为产酸，“K”为产碱。

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：250g

　　参考文献：

　　1.GB/T4789.4-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

　　2.GB/T4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法，培养基和试剂

　　3.GB/T4789.5-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 志贺氏菌检验

　　4. GB/T4789.6-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 致泻大肠埃希氏菌检验

　　5.SN0170-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)检验方法

　　6.GB/T4789.4-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

　　7.GB 4789.4-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

　　8.GB 13091-91 中华人民共和国国家标准 饲料中沙门氏菌的检验方法

　　9.SN/T2206.1-2008中华人民共和国进出口商品检验行业标准 化妆品微生物检验方法 第1部分：沙门氏菌