028265 4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基
(MUG Medium)
用 途:
4-甲基伞形酮葡糖苷酸培养基用于大肠埃希氏杆菌快速检测。(《中华人民共和国药典》2010年版)
原 理:
胨提供碳氮源;硫酸铵、硫酸锰、硫酸锌、硫酸镁、氯化钠和氯化钙提供各种离子可维持均衡的渗透压及利于目标菌的生长;磷酸二氢钾和磷酸氢二钠为缓冲剂;亚硫酸钠和去氧胆酸钠为选择性抑菌剂。
细菌的葡萄糖醛酸苷酶在碱性条件下,作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
配方(每升):
胨 10.0g
硫酸锰 0.5mg
硫酸锌 0.5mg
硫酸镁 0.1g
氯化钠 5.0g
氯化钙 50.0mg
磷酸二氢钾 0.9g
磷酸氢二钠 6.2g
亚硫酸钠 40.0mg
去氧胆酸钠 1.0g
MUG 75mg
最终pH7.3±0.1
使用方法:
1、称取4-甲基伞形酮葡糖苷酸培养基33.4g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管,每管5.0mL,115℃高压灭菌20min。
2、取待检菌的固体培养物,或3份胆盐乳糖培养基的培养物各0.2 mL,分别接种至5mLMUG培养基管中,置30~35℃培养5h和24h。
1、 观察结果:将培养基管置366nm紫外灯下约5cm处,以未接种培养物的MUG培养基作空白对照,观察有无蓝白色荧光。空白对照管应无蓝白色荧光,试验管出现蓝白色荧光为阳性反应。
质量控制:
下列质控菌株接种后于30~35℃培养5h,结果如下:
注意事项:
1、 试验用试管应事先检测,在366nm紫外灯下无荧光产生者,方可应用。
2、 本试验与靛基质试验可同时测定,即观察荧光后再加入柯凡克试剂观察靛基质反应,若皆为阳性反应,即可判定待检菌为大肠埃希氏杆菌。
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:100g
参考文献:
1. 《中华人民共和国药典》2010年版,附录XI J 微生物限度检查。