028050 水解酪蛋白胨(MH)琼脂
(Mueller Hinton Agar)
用 途:
水解酪蛋白胨(MH)琼脂适用于扩散法进行药敏试验。
原 理:
牛肉浸出粉和酪蛋白水解物提供氮源、维生素和氨基酸;可溶性淀粉吸收有毒的代谢产物;琼脂是培养基的凝固剂。
培养基配方(每升):
琼脂 17g
牛肉 300g(从中提取浸出粉)
可溶性淀粉 1.5g
酪蛋白水解物 17.5g
最终pH7.3±0.2
使用方法:
1、称取水解酪蛋白胨(MH)琼脂38g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2、试验菌液的制备:从TSA平皿上挑取3—5个形态相似的菌落顶端部分接种MHB或TSB培养基。经36±1℃培养4—6小时后,比浊至0.5麦氏单位。
3、接种:用无菌棉拭浸取比浊好的菌液,在管壁内轻轻转压除去过多菌液,然后再轻轻涂抹培养基,每一平皿涂抹三次。每次涂抹后均需将平皿转动60度,再行下一次涂抹。每一质控菌株涂抹三个平皿。
4、贴片:接种后的平皿置室温片刻,待稍干后,用无菌镊子将抗生素纸片均匀贴布于平皿琼脂表面。各纸片间中心间距不得小于24mm,纸片距平皿边不得小于15mm。一旦纸片接触琼脂表面,即不可再移动,因此时药物已开始扩散。
5、培养:纸片贴妥后,在15—30分钟内,将平皿翻过来置于36±1℃培养16—24h后,观察结果。平皿培养时不宜堆放,以二个相叠为宜。
质量控制:
质控菌株添加下列抗菌素后,于36±1℃培养16—24h后结果如下:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g