028031 亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)

　　(Sulfite Polymixin Sulphadiazine Agar Base)

　　用 途：

　　亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础用于食品和矿泉水中产气荚膜梭菌的分离培养和计数(GB/T 8538-2008，GB/T4789.28-2003中4.69，GB/T4789.13-2003)。

　　原 理：

　　胰酪胨和酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;亚硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色;琼脂是培养基的凝固剂;多粘菌素B和磺胺嘧啶钠抑制非梭菌的细菌生长。

　　配方(每升)：

　　胰酪 胨 15g

　　酵母膏粉 10g

　　柠檬酸铁铵 1g

　　琼脂 15g

　　最终pH 7.6±0.2

　　使用方法：

　　1、称取本品41.5g，加入蒸馏水或去离子水1000 mL ，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，每 瓶250 mL ，121℃高压灭菌15 mL。

　　2、待SPS培养基冷至50℃左右，每100 mL培养基基础加入配套试剂2支(SR0150)(试剂a：，亚硫酸钠50mg和试剂b：磺胺嘧啶钠1.2mg和多粘菌素B1.2mg)，摇匀。

　　3、无菌操作取食品样品35g(mL)放入均质器中，加0.1%蛋白胨水225mL，均质1—2min，然后吸取1：10稀释液按1mL加0.1%蛋白胨水9mL做成10-2—10-6系列稀释液，吸取各稀释液1 mL分别加到两个灭菌平皿，再向平皿中倾注培养基15 mL，缓慢地旋转平皿，使其与接种物混合均匀。

　　4、琼脂凝固后，将平板正置于厌氧罐内，于36±1℃培养24h。

　　5、取出平板用肉眼观察生长情况和观察有无黑色菌落。挑选生长有30—300个黑色菌落的平板计数。

　　质量控制：

　　下列菌株接种于SPS琼脂平板于36±1℃培养24 h结果如下：

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：250g

　　参考文献：

　　1. GB/T 4789.13-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验 产气荚膜梭菌检验

　　2. GB/T 4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 染色法, 培养基和试剂

　　3. GB/T 8538-2008 中华人民共和国国家标准 饮用天然矿泉水检验标准