027382 改良CCD琼脂
Modified charcoal cefoperazone deoxycholate agar,mCCDA
用 途:
用于空肠弯曲菌的选择性分离培养。(GB4789.9-2008,ISO标准)
原 理:
肉浸液、动物组织酶解物、酪蛋白酶解物提供碳、氮源、维生素、生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;木炭具有解毒、收集二氧化碳和改变表面张力的作用;去氧胆酸钠为选择性抑菌剂;头孢哌酮可抑制普通肠道菌生长、两性霉素B 抑制酵母和真菌生长、利福平可抑制非弯曲菌其他厌氧菌。硫酸亚铁和丙酮酸钠有利于空肠弯曲菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂。
基础配方(每升):
肉浸液 10g
动物组织酶解物 10g
氯化钠 5g
木炭 4g
酪蛋白酶解物 3g
去氧胆酸钠 1g
硫酸亚铁 0.25g
丙酮酸钠 0.25g
琼脂 12g
最终pH 7.2±0.2
配套试剂配方:(每100mL)
头孢哌酮 0.0032g
两性霉素B 0.001g
利福平 0.001g
使用方法:
1. 称取改良CCD琼脂45.5g,加入蒸馏水或去离子水1000mL搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2. 每支冻干配套试剂在无菌操作条件下加入1mL无菌水,45℃水浴加热完全溶解。将灭菌培养基融化并冷却至45℃左右,每100mL基础培养基加入1瓶配套试剂SR0320混合后倾注平板。
3. 用接种环挑取24h增菌液、48h增菌液及相应的1:50稀释液,划线平板,在微需氧条件,42℃±1℃培养48±2h。
4. 观察结果。
质量控制:
下列质控菌株接种后于42℃±1℃微需氧培养48±2h结果如下:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1. GB/T 4789.9-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 空肠弯曲杆菌检验
2. 美国FDA Bacteriological Analytical Manual Chapter 7 Campylobacter
3. ISO10272-1995 Microbiology of food animal feeding stuffs-Horizontal method for detection of thermotolerant Campylobacter