027380 Bolton肉汤基础

　　Bolton broth

　　用 途：

　　Bolton肉汤基础用于空肠弯曲菌选择性增菌培养。(GB4789.9-2008)

　　原 理：

　　乳白蛋白水解物、动物组织酶解物提供碳、氮源;酵母浸膏提供各种维生素;氯化钠维持均衡的渗透压;丙酮酸钠和偏亚硫酸氢钠能中和培养基的有毒物质，也能增强培养基的空气耐受力;a-酮戊二酸提供生长因子，促进空肠弯曲菌的生长;碳酸钠提供空肠弯曲菌最有利的酸碱环境;头孢派酮和多粘菌素B抑制革兰氏阴性菌;万古霉素和三甲氧苄胺嘧啶抑制革兰氏阳性菌;两性霉素B抑制酵母和真菌的生长。

　　培养基配方(每升)：

　　1基础配方

　　动物组织酶解物 10g

　　乳白蛋白水解物 5g

　　酵母浸膏 5g

　　氯化钠 5g

　　丙酮酸钠 0.5g

　　偏亚硫酸氢钠 0.5g

　　碳酸钠 0.6g

　　a-酮戊二酸 1g

　　最终pH 7.2±0.2

　　2抗生素冻干配套试剂

　　头孢派酮 0.02g

　　万古霉素 0.02g

　　三甲氧苄胺嘧啶乳酸盐 0.02g

　　两性霉素B 0.01g

　　多粘菌素B 0.01g

　　3 完全培养基

　　基础培养基 100ml

　　无菌裂解脱纤维绵羊或马血 5ml

　　抗生素冻干配套试剂 1支

　　使用方法：

　　1. 称取Bolton肉汤基础27.6g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min。

　　2. 在冷却至45℃左右的bolton肉汤，在无菌条件下，每100ml培养基加入经反复冻融的无菌脱纤维羊或马血5ml和1支配套试剂SR0340。

　　3. 样品处理参考标准。

　　4. 预增菌与增菌：

　　在微需氧条件下，以100r/min的振荡速度，36±1℃培养4h。42℃±1℃继续培养48±2h。

　　质量控制：

　　下列质控菌株接种后于42℃±1℃微需氧培养48±2h结果如下：

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：250g

　　参考文献：

　　1. GB/T 4789.9-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 空肠弯曲杆菌检验

　　2. 美国FDA Bacteriological Analytical Manual Chapter 7 Campylobacter