027315 MRS培养基(莫匹罗星锂盐改良MRS培养基基础)

　　(Man Rogosa Sharpe Medium)(Li-Mupirocin Modified MRS Medium Base)

　　用 途：

　　MRS培养基用于乳酸菌的分离、计数和培养。(GB/T 4789.35-2010，SN/T1941.1-2007和ISO标准)

　　原 理：

　　蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂;柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，其成分还能抑制某些杂菌;琼脂是培养基的凝固剂。

　　MRS培养基配方(每升)：

　　蛋白胨 10g

　　牛肉膏粉 5g

　　酵母膏粉 4g

　　葡萄糖 20g

　　吐温-80 1.08g

　　磷酸氢二钾 2g

　　乙酸钠 5g

　　柠檬酸三铵 2g

　　硫酸镁(MgSO4.7H2O) 0.2g

　　硫酸锰(MnSO4.4H2O) 0.05g

　　琼脂 15g

　　最终pH 6.2±0.2

　　使用方法

　　1、称取本品64.3g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

　　2、无菌操作将经过充分摇匀的检样25g(或25mL)，放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内，振摇均匀，即为1：10稀释液，依次做1：100、1：1000……稀释。

　　3、将培养基凉至50℃左右，注入平皿中约15mL，待琼脂凝固。

　　4、选择2-3个合适的稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，吸取0.1mL稀释液于平皿上，用L型棒涂布，每个稀释度做2个平皿。翻转平板，乳杆菌在兼性厌氧条件，双歧杆菌在厌氧条件下，混合菌应分别兼性厌氧和厌氧条件下，36±1℃培养48h。

　　5、选择菌落数在30-300个之间的平皿进行计数，并乘以相应的稀释倍数，以10的指数表示进行报告。

　　质量控制：

　　下列质控菌株接种后于36℃±1℃兼性厌氧培养48h结果如下：

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：250g

　　参考文献：

　　1.GB/T4789.35-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验标准 乳酸菌检验

　　2.GB 4789.35-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验标准 乳酸菌检验

　　3.SN/T1941.1-2007 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中乳酸菌检验方法 第1部分 分离与计数方法。

　　4.ISO 15214-1998 Microbiology of food animal feeding stuffs-Horizontal method for the emumeration of mesophilic lactic acid bacteria-Colony- technique at 30℃.