025102 山梨醇麦康凯琼脂基础(SMAC)
(Sorbitol MacConkey Agar)
用 途:
山梨醇麦康凯琼脂基础用于致病性大肠杆菌(包括O157:H7)的分离培养(SN/T0973-2000和SN/T 1827-2006 )。
原 理:
蛋白胨、月示胨提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;山梨醇为可发酵的糖类;猪胆盐、结晶紫、亚碲酸钾和头孢克肟抑制革兰氏阳性菌;中性红为pH指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。
培养基配方(每升):
蛋白胨 17g
月示胨 3g
猪胆盐 5g
氯化钠 5g
琼脂 15g
山梨醇 10g
结晶紫 0.001g
中性红 0.025g
最终pH7.2±0.2
使用方法:
1、称取山梨醇麦康凯琼脂基础55g,加入蒸馏水或去离子水1000毫升,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶。
2、待基础培养基冷至50—55℃时,每500毫升培养基加入配套试剂1支(SR0020)(1.25mg亚碲酸钾),如需增强对杂菌的抑制作用,可添加0.01mg头孢克肟至500毫升培养基中,混匀并倾注灭菌培养皿,凝固后备用。
3、将增菌后的m(EC)n肉汤进行10倍递增稀释,从10-4、10 –5、10 –6,各取0.1毫升滴于SMAC平板上以灭菌L棒进行涂布后,置于36±1℃培养18-24小时。
4、观察结果。挑取SMAC平板上呈淡褐色中心,扁平透明,边缘光滑,直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。
质量控制:
质控菌株接种后于36±1℃培养18-24小时,结果如下:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1. SN/T 0973-2000 中华人民共和国进出口商品检验检疫行业标准 进出口肉及肉制品中肠出血性大肠杆菌O157:H7 检验方法
2. SB/T10462-2008 中华人民共和国国内贸易行业标准 进出口肉及肉制品中肠出血性大肠杆菌O157:H7 检验方法
3. SN/T 1827-2006 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 出口食品中产志贺毒素大肠杆菌检验方法