024025 甲苯胺蓝-DNA琼脂

　　(Toluidine Blue-DNA Agar)

　　用 途：

　　甲苯胺蓝-DNA琼脂用于金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶的试验。 (SN 0172-92)。

　　原 理：

　　具有脱氧核糖核酸酶的细菌分解培养基中的脱氧核糖核酸(DNA)，使DNA长链水解成数个单核苷酸的寡核苷酸短链，使指示剂甲苯胺蓝作用变成粉红色;氯化钙提供阳离子作为激活剂;氯化钠维持均衡的渗透压;三羟甲基氨基甲烷为缓冲剂;琼脂为培养基的凝固剂。

　　培养基配方(每升)：

　　脱氧核糖核酸(DNA) 0.3g

　　氯化钙 0.0011g

　　氯化钠 10g

　　甲苯胺蓝 0.083g

　　三羟甲基氨基甲烷 6.1g

　　琼脂 10g

　　最终pH 9.0±0.2

　　使用方法：

　　1. 称取甲苯胺蓝-DNA琼脂26.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌15min(即用可不需灭菌)，备用。

　　2. 载玻片的制备：取3mL甲苯胺蓝-DNA琼脂平铺于在载波片上制成标本，待琼脂凝固后，在琼脂上打成直径2mm的小洞(每个载玻片10-12个)，抽出小洞中的琼脂块。

　　3. 从Baird-parker平板挑一个可疑单菌落接种普通肉汤培养基中，36±1℃培养20h～24h后，经过100℃沸水煮15min,取0.01mL接种所制备的载玻片上小洞，于35℃培养4h后，观察结果。

　　质量控制：

　　质控菌株接种后，于35℃培养4h结果如下：

　　贮 存：2～8℃避光贮存

　　贮 存 期：三年

　　规 格：100g

　　参考文献:

　　1.SN0172-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法