022225 结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG)

　　(Violet Red Bile Agar-MUG)

　　用 途：

　　结晶紫中性红胆盐MUG琼脂用于食品中大肠杆菌的平板计数。(GB/T 4789.38-2008)

　　原 理：

　　蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌，特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;中性红为pH指示剂;琼脂为凝固剂;大肠埃希氏杆菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键，使其水解，释放的4-甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。

　　培养基配方(每升)：

　　蛋白胨 7.0g

　　酵母膏粉 3.0g

　　乳糖 10.0g

　　氯化钠 5.0g

　　3号胆盐 1.5g

　　中性红 0.03g

　　结晶紫 0.002g

　　琼脂 15.0g

　　MUG 0.1g

　　最终pH 7.4±0.2

　　使用方法：

　　1、称取结晶紫中性红胆盐MUG琼脂41.6g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，无需高压灭菌，备用。

　　2、以无菌手续取样品25g或25mL，加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内，充分振摇或用均质器均质1min成1：10稀释液，然后以1：10继续稀释，选择2～3个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种两个平皿，倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基，琼脂凝固后再加3-4mL培养基覆盖平板表层。

　　3、36±1℃培养18—24h。

　　4、观察菌落形态，并于暗室中用360nm～360nm波长紫外灯照射，计数平板上发浅蓝色荧光的菌落。

　　质量控制：

　　质控菌株接种后于36±1℃培养18—24h结果如下：

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。

　　规 格：100g

　　参考文献:

　　1. GB/T 4789.38-2008 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验 大肠杆菌计数