022221 结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)
(Violet Red Bile Agar)
用 途:
结晶紫中性红胆盐琼脂用于水或食品中大肠菌群平板菌落计数(GB 4789.3-2010和SN0169-92)。
原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;中性红为pH指示剂。
培养基配方(每升):
蛋白胨 7g
酵母膏粉 3g
乳糖 10g
氯化钠 5g
3号胆盐 1.5g
中性红 0.03g
结晶紫 0.002g
琼脂 15g
最终pH 7.4±0.2
使用方法:
1、 称取结晶紫中性红胆盐琼脂41.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,备用(不得超过3h)。
2、 以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:
10继续稀释,选择三个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基,琼脂凝固后再加3-4mL培养基覆盖平板表层。
3、36±1℃培养18—24h。
4、观察结果。
质量控制:
质控菌株接种后于36±1℃培养18—24h结果如下:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1.GB/T4789.3-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 大肠菌群检验
2.GB/T4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法,培养基和试剂
3.SN 0169-92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中大肠菌群,粪大肠杆菌和大肠杆菌检验方法
4.GB/T4789.4-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 大肠菌群检验
5.GB 4789.3-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验 大肠菌群检验