022175 抗生素检定培养基3号

　　(Antibiotic Agar No.3)

　　用 途：

　　抗生素检定培养基3号用于庆大霉素效价的微生物学检定及藤黄八叠球菌菌悬液制备(中华人民共和国药典2010版)。

　　原 理：

　　利用抗生素在液体培养基中对试验菌生长的抑制作用，通过测定培养后细菌浊度值的大小，比较标准品与供试品对试验细菌生长抑制的程度，以快速测定供试品效价的一种微生物学方法。

　　配方(每升)：

　　胨 5g

　　牛肉浸出粉 1.5g

　　酵母浸出粉 3g

　　氯化钠 3.5g

　　磷酸氢二钾 3.68g

　　磷酸二氢钾 1.32g

　　葡萄糖 1g最终pH 7.1±0.1

　　使用方法(浊度法)：

　　1、称取抗生素检定培养基3号19g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装入三角瓶中,115℃高压灭菌30min。

　　2、将适量菌液加入灭菌后培养基中，混匀后，在各无菌试验管内精密加入含试验菌的液体培养基9.0mL，再分别精密加入各浓度的标准品或供试品溶液各1.0mL，立即混匀，按随机区分组分配将各管在规定条件下培养至适宜测量的浊度值(通常约为4小时)。

　　3、在线测定或取出立即加入甲醛溶液(1→3)0.5mL以终止微生物生长，在530nm或580nm波长处测定各管的吸光度。

　　4、同时另取2支试管，各加入药品稀释剂1.0mL，再分别加入含试验菌的液体培养基9.0mL,其中一支试管与上述各管同法操作作为细菌生长情况的阳性对照，另一支试管立即加入甲醛溶液0.5mL，混匀，作为吸光度测定的空白液。

　　5、照标准曲线法进行可靠性测验及效价计算。

　　质量控制：

　　本品倾注平皿后呈玫瑰红色，下列菌株接种后35~37℃培养3~4h生长情况如下表：

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：100g

　　参考文献：

　　1. 《中华人民共和国药典》2010年版，附录XI A 抗生素微生物鉴定法。