022130 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基)

　　(MR-VP Medium)

　　用 途：

　　缓冲葡萄糖蛋白胨水用于MR和VP试验(GB 4789.30-2010，SN0169-92和《中华人民共和国药典》2010年版)。

　　原 理：

　　多胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖类;磷酸氢二钾是缓冲剂;氯化钠维持均衡的渗透压。

　　甲基红(MR)试验：肠杆菌科的细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮酸再被分解，生成甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸。大肠杆菌分解丙酮 酸，次生的酸类较多，pH为4.5或更低，甲基红呈现红色(阳性)。在产气杆菌的培养液中一部分丙酮酸变为中性的乙酰甲基甲醇，生成的酸类较少，pH在5.4以上，甲基红呈现桔黄色(阴性)。

　　乙酰甲基甲醇生成试验(V—P试验)：细菌发酵葡萄糖生成丙酮酸，某些细菌可使丙酮酸脱羧形成乙酰甲基甲醇。在碱性溶液中，乙酰甲基甲醇可在空气中氧化成二乙酰(丁二酮)。二乙酰再与蛋白胨中精氨酸的胍基作用，生成红色化合物。试验中加入α—萘酚是作催化剂，使反应的颜色加深，提高反应的敏感性。

　　缓冲葡萄糖蛋白胨水配方(每升)：

　　磷酸氢二钾 5g

　　多胨 7g

　　葡萄糖 5g

　　最终pH 7.0±0.2

　　使用方法：

　　1、称取本品17g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管每管1mL，121℃高压灭菌15min。

　　2、甲基红(MR)试验

　　A：取少量待检菌的新鲜纯培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2—5d，

　　哈夫尼亚菌则应在22—25℃培养。

　　B：48h取出部分培养液，滴加(029040)甲基红试剂三滴，立即观察结果。鲜红色为阳性，黄色为阴性。

　　3、V—P试验

　　A：取待检菌的新鲜纯培养物接种本培养基中，于36±1℃培养2—4d， 哈夫尼亚菌则应在22—25℃培养。

　　B：48h后取出部分培养液，按顺序加入1/2培养液体积的(029050)VP试剂甲液和1/5体积的乙液充分摇匀试管，观察结果。阳性者应立刻或数分钟内出现红色，如为阴性，应放在36±1℃下培养4h后再进行观察。

　　质量控制：

　　本品接种后于36±1℃培养48h，滴加试剂，生化特征如下：

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

　　规 格：250g

　　参考文献：

　　1.GB/T4789.4-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

　　2.GB/T4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法，培养基和试剂

　　3.GB/T4789.4-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

　　4.GB/T4789.38-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 大肠杆菌计数

　　5.GB/T4789.30-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验 大肠杆菌计数

　　6.《中华人民共和国药典》2010年版 附录XI J 微生物限度检查。

　　7. SN/T 0184-93 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验

　　8. SN/T 0184.1-2005 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验

　　9. SN 0169-1992中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法