022040 乳糖胆盐发酵培养基
(Lactose Bile Ferment Broth)
用 途:
乳糖胆盐发酵培养基用于多管发酵法测定食品、药品、纯净水、矿泉水和一次性使用卫生用品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌(GB/T 8538-2008和GB15979-2002,中华人民共和国药典2010年版)。
原 理:
胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;牛胆盐可抑制革兰氏阳性细菌的生长;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫是pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色。
培养基配方(每升):
胨 20.0g
牛胆盐 5.0g
乳糖 10.0g
溴甲酚紫 0.01g
最终pH 7.4±0.2
使用方法:
1、称取乳糖胆盐发酵培养基35克(单料)或70克(双料)加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装于带有小倒管的试管中,培养基每管10mL,115℃高压灭菌15min。
2、样品的处理及稀释。略。
3、(1)食品:取1mL稀释液,加入到含有10mL乳糖胆盐培养基的试管中,根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选取三个合适的稀释度每个稀释度接种三管。将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。
(2) 一次性使用卫生用品:取样液5mL接种50mL单料乳糖胆盐发酵管。
(3)药品:取不少于10ml的乳糖胆盐发酵培养管3支,分别加入1:10的供试液1ml;1:100的供试液1ml;1:1000的供试液1ml,另取1支乳糖胆盐发酵培养基管加入稀释液1ml作为阴性对照管。
4、将试管放入到培养箱中36±1℃培养24h;药品放入30~35℃培养箱中培养18~24h。
5、观察结果。如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则要进行分离、证实试验。
质量控制:
配成的培养基呈紫色,质控菌株接种后,于36±1℃培养24h或者30~35℃培养18~24h结果如下:
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1. 《中华人民共和国药典》2010年版,附录XI J 微生物限度检查。
2. GB/T 4789 .3—2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验标准 大肠菌群检验
3. GB15979-2002中华人民共和国国家标准一次性卫生用品卫生标准
4. GB/T 8538-2008 中华人民共和国国家标准 饮用天然矿泉水检验标准
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