大肠杆菌O157:H7显色培养基

　　(Chromogenic E.coli O157:H7 Agar)

　　用 途：

　　用于大肠杆菌O157:H7的快速分离和鉴定。(SN/T 1827-2006)

　　原 理：

　　蛋白胨提供碳源和氮源;胆盐抑制革兰氏阳性菌的生长;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;混合碳水化合物为可发酵的糖类;中性红是pH指示剂，细菌发酵糖产酸时菌落呈桃红色;亚碲酸钾抑制非大肠杆菌O157:H7菌的生长;混合色素与大肠杆菌O157:H7所具有的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在浅红色平板上产生蓝绿色的菌落。

　　配方(每升)：

　　蛋白胨 8.6g

　　氯化钠 5g

　　混合碳水化合物 　　　　　　 25g

　　中性红 　　　　　　　　　　　 0.015g

　　胆盐 1.5g

　　混合色素 　　　　　　　　　　 0.3g

　　琼脂 15g

　　最终pH 7.0±0.2

　　使用方法：

　　1、称取本品55.4g，加入蒸馏水或去离子水1000毫升，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶。

　　2、待基础培养基冷至50℃时，每100毫升培养基加入1瓶(SR0200)无菌亚碲酸钾溶液1mL，如样品中含有较多的变型杆菌，可添加0.0025mg头孢克肟至100毫升培养基中，混匀并倾注灭菌培养皿，凝固后备用。

　　3、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液，用接种环取1环增菌液，划线接种于显色平板上，置于36±1℃培养18-24小时。

　　4、观察结果。挑取大肠杆菌O157:H7显色培养基平板上呈蓝绿色，扁平透明，边缘光滑，直径约2mm的可疑菌落进行进一步的试验。

　　5、对疑似大肠杆菌O157:H7菌落可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验和O157:H7菌血清学试验。

　　质量控制：

　　大肠杆菌O157:H7显色培养基倾注平皿后呈浅红色，下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表:

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。

　　规 格：可配置1L的培养基干粉。

　　参考文献:

　　1.SN/T 1827-2006 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 出口食品中产志贺毒素大肠杆菌检验方法