识别位点
Remove-iT 肽 N-糖苷酶 F 可以水解糖肽/蛋白上所有类型的 N-多糖链 [x = H 或者寡糖]。
特性
从糖蛋白移除 N-连接糖
更多详细结构特异性请翻阅 231 页
概述
Remove-iT 肽 N-糖苷酶 F 是一种酰胺酶，可以在 N-连接糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分最内侧的 N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间进行切割（1）。Remove-iT 肽 N-糖苷酶F 加有几丁质结合域（CBD）标签，易于从反应中去除。以不含甘油的形式提供，便于在 HPLC 和 MS 分析中取得最佳效果。
来源
从脑膜炎脓杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
反应条件
将糖蛋白于 1X DTT（40 mM）中 55℃ 温育 10 分钟使其变性。1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中 37℃ 温育 1 小时。
热失活：75℃ 10 分钟。
随酶提供的试剂
10X DTT
10X GlycoBuffer 2 反应缓冲液
分子量
质量保证
无糖苷外切酶或糖苷内切酶 F1、F2 或 F3活性污染，无蛋白水解活性。
单位定义
1 单位指 10 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时从 5 μg DTT 变性的 RNase B 中移除超过95% 的碳水化合物所需要的酶量。
浓度
注意事项
当使用包含 SDS 和 DTT 的 NEB 糖蛋白变性缓冲液对 RNase B 进行变性时，需要 500,000 U/ml 高浓度 Remove-iT 肽 N-糖苷酶 F。
当 Remove-iT 肽 N-糖苷酶 F 在糖苷酶 F 变性条件下使用时，需要在反应混合物中加入 NP-40，因为SDS 抑制 Remove-iT 糖苷酶 F 活性。目前还不清楚非离子变性剂 SDS 对 Remove-iT 糖苷酶 F 的抑制机理。
去糖基化反应完成后，可以用几丁质磁珠去除Remove-iT 肽 N-糖苷酶 F，且几丁质磁珠的用量与去除 Remove-iT 肽 N-糖苷酶 F 成正比线性关系。
参考文献
有关该产品特性和应用的相关文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。
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