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miRNA 通用克隆接头
#S1315S 5 μg ¥2,109
特性
将 5´ 预腺苷化的 DNA 或 RNA 序列标签连接到任何 RNA 3´ 末端
将单链腺苷化引物连接至小 RNA 上，用于 cDNA 文库构建
将单链腺苷化引物连接至 RNA 上，用于链特异 cDNA 文库构建
概述
T4 RNA 连接酶 2，截短型（T4 Rnl2 截短型）可特异性地将 DNA 或 RNA 的预腺苷化 5´ 末端连接到 RNA 3´ 末端。该酶连接时不需要 ATP，但需要预腺苷化底物。T4 Rnl2 截短型的表达来自 E. coli 质粒，该质粒编码 T4 RNA 连接酶 2 基因的前 249 个氨基酸。与全长的 T4 RNA 连接酶 2 不同，T4 Rnl2 截短型不能将底物的 5´ 末端腺苷化，因此无法将 RNA 或 DNA 的 5´ 磷酸末端连接到 RNA 的 3´ 端。该酶即 Rnl2（1-249），可用于 microRNA 克隆中接头连接的优化，因为此酶只能利用腺苷化的引物，因此可以降低连接背景。
来源
携带 T4 RNA 连接酶 2 截短型基因的重组 E. coli 菌株。
反应条件
1X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 7.5 @ 25℃)，10 mM MgCl2，1 mM DTT]，25℃ 温育。
热失活：65℃ 20 分钟。
随酶提供的试剂
10X T4 RNA 连接酶反应缓冲液
50% PEG 8000
质保声明
无单链和双链 DNA 核酸外切酶、核酸内切酶、RNase 以及磷酸酶的污染。
单位定义
200 单位指 10 μl 反应体系中，25℃ 条件下，1 小时将 80% 的 31-mer RNA 连接到预腺苷化 17-mer DNA 末端所需的酶量。单位活性检测条件见 www.neb-china.com 或 www.neb.com。
浓度
参考文献
有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。
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