特性
切刻聚合酶产物,掺入核糖核苷酸
与 T7 核酸内切酶 I 联合使用时,在掺入有核糖核苷酸区域位点处产生一个双链的缺口
降解冈崎片段或其它 RNA-DNA 杂交链中的 RNA 部分
概述
核糖核酸酶 HII(RNase HII)为核糖核酸内切酶,适用于在双链 DNA 内部切刻核糖核酸的 5´ 末端,产生 5´ 磷酸和 3´ 羟基末端。RNase HII 还可以在冈崎片段的 RNA 部分进行多处切割。
来源
重组 E. coli 菌株,该菌株携带来自 E. coli 的 RNase HII 基因(rnhB)和编码麦芽糖结合蛋白基因(MBP)的融合基因。亲和层析后,用 Xa 因子将 RNase HII 从融合蛋白中切割分离,然后再进行纯化去除 MBP 和 Xa 因子。从 MBP 中切割下来的 RNase HII 在其 N 端多出四个氨基酸(Ile -Ser-Glu-Phe)。
反应条件
1X ThermoPol 反应缓冲液
[10 mM KCl,20 mM Tris-HCl,10 mM (NH4)2SO4,2 mM MgSO4,0.1% Triton X-100 (pH 8.8 @ 25℃) ],37℃ 温育。
质保声明
单位定义
1 单位指 1X ThermoPol 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟产生与切刻 100 pmol 人工合成双链 RNA 底物相同的荧光信号所需的酶量。该合成双链底物在荧光探针/淬火对的淬火域附近含有单个核糖核苷。单位活性检测条件请登陆www.nebchina.com 或 www.neb.com 。
浓度
注意事项
与 0.1% SDS 一起温育足以灭活 RNase HII。
参考文献
有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。