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RNase H
#M0297S 250 units ¥699
#M0297L 1,250 units ¥2,789
特性
不同起始量的 RNA 均能高效反转录
提高热稳定性
合成至少 10 kb 长度的 cDNA
概述
ProtoScript II 反转录酶是 M-MuLV 反转录酶的重组蛋白,其RNase H 活性降低且热稳定性增加。与野生型M-MuLV 反转录酶相比,ProtoScript II 可在更高的温度下合成第一链cDNA。ProtoScript II 活性温度高达50℃,且具有特异性高、产量高和合成 cDNA 更长的特点,合成 cDNA 长度可达 12 kb。本产品曾用名为 M-MuLV 反转录酶 (RNaseH-)。
来源
来自重组 E. coli 菌株,携带有突变的 MMuLV 反转录酶(RNase H-)编码基因,经高度纯化而获得。
反应条件
1X ProtoScript II 反转录酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25℃),75 mM KCl,3 mM MgCl2],10 mM DTT,200 units ProtoScript II ,0.5 mM dNTPs(不随酶提供)和 5 μM dT23VN(不随酶提供),42℃ 温育 50 分钟。如果使用随机引物建议在室温放置 10 分钟后再进行 42℃ 反应。
热失活:65℃ 20 分钟。
质保声明
通过 RT-PCR 验证,以总 RNA 为模板可合成 9.2 kb 的 cDNA。
单位定义
1 单位指在 50 μl 反应体系中,以 poly(rA) 为模板,以 oligo(dT)18 为引物,37℃ 条件下,10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入形成酸不溶性沉淀物所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb-china.com 或www.neb.com。
浓度