特性
从琼脂糖凝胶中提取 DNA
不含 DNase 和 RNase
概述
β-琼脂糖酶切割琼脂糖亚单位或未置换的新琼脂乙糖（3,6-酐-α-L-吡喃型半乳糖基-1-3-D-半乳糖）生成新琼脂-寡糖。β-琼脂糖酶 I消化琼脂糖，形成不能再成胶的碳水化合物分子，同时释放所俘获的 DNA。通常残留的碳水化合物分子或 β-琼脂糖酶 I 不会影响随后的限制性内切酶消化、连接反应及转化反应等 DNA 操作。
来源
重组 E. coli 菌株，此菌株的质粒上携带有 β-琼脂糖酶 I 的编码基因。
反应条件
1X β-琼脂糖酶 I 反应缓冲液
[10 mM Bis Tris-HCl（pH 6.5 @ 25℃），1 mM EDTA]，42℃ 温育。
注意事项
琼脂糖：由于在反应温度 42℃ 条件下，溶液必需呈液态，所以仅低熔点琼脂糖适合于用 β-琼脂糖酶 I 消化。
pH 敏感性：β-琼脂糖酶 I 在 pH 6.5 时有最适酶活力，在 pH 5.0-8.5 范围内可以保持 ＞ 75% 的酶活力。
盐敏感性：NaCl 或 Na2EDTA 浓度在 50 到 500 mM之间不影响 β-琼脂糖酶 I 活性。
质保声明
β-琼脂糖酶 I 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
单位定义
1 单位指 42℃ 条件下，1 小时消化 200 μl 低熔点琼脂糖或 NuSieve 琼脂糖生成可溶性新琼脂-寡糖所需的酶量。
经 β-琼脂糖酶 I处理后乙醇沉淀的琼脂糖量
65℃ 条件下在含 1 mM Na2EDTA 的 10 mM Bis Tris-HCl 中熔化含 200 μl 1% 低熔点琼脂糖凝胶的样品，冷却到 42℃，加入 1 单位或 2 单位的 β-琼脂糖酶 I 反应不同时间。不能被消化的琼脂糖可通过加入终浓度为 250 mM 的 NaOAc 和 75% 的异丙醇，-70℃ 冷却来沉淀，沉淀后的琼脂糖可通过在 0.1 N 的 HCl中煮沸水解。碳水 化合物含量以占 200 μl 未消化低熔点琼脂糖凝胶的百分比表示。
浓度
热失活
95℃ 加热 2 分钟或 65℃ 15 分钟温育可使 50 单位的 β-琼脂糖酶 I 失活。β-琼脂糖酶 I 可以在 45-50℃ 保持几个小时的活性。反应体系中存在琼脂糖可以稳定 β-琼脂糖酶 I。
参考文献
关于该酶性质和产品应用的参考文献，请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
新浪微博
腾讯微博
QQ空间
客服
