特别提供
快速末端平齐化? 和快速连接试剂盒
#E0542S 20 次反应 . ￥1,769
#E0542L 100 次反应 . ￥7,059
特性
5 分钟快速连接粘性末端或平末端
室温下即可进行连接反应
T/A 克隆
dsDNA 切刻修复
概述
本试剂盒在室温（25℃）反应 5 分钟，即可完成 DNA 粘性末端或平末端的连接反应。
快速连接试剂盒组份
- 快速 T4 DNA 连接酶（重组酶）
- 2X 快速连接反应缓冲液
2X 快速连接反应缓冲液
132 mM Tris-HCl，20 mM MgCl2，2 mM DTT，2 mM ATP，15% 聚乙二醇（PEG 6000），pH 7.6 @ 25℃。
质保声明
该试剂盒经过严格的质量控制检测，以确保该产品的最高纯度和效率。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。
注意事项
用快速连接试剂盒能使大多数连接反应在 25℃ 条件下 5 分钟甚至更短时间内达到反应终点，增加反应时间不会提高反应效率。事实上，连接 1 小时后转化效率会降低，如果 25℃ 过夜反应，转化效率会下降 75%。
电转化可以使转化效率提高几个数量级。在用快速连接反应产物做电转化前，一定要降低 PEG 浓度。推荐使用柱离心式 DNA 纯化方法，或选择电转连接酶（NEB #M0369）。 |
快速连接进程曲线：LITMUS 28i 载体经 EcoRV 切割（平齐末端）或 HindIII 切割（粘性末端）后，用小牛肠碱性磷酸酶（CIP）处理，胶回收纯化。插入片段来自 HaeIII 消化的 φX174 DNA 产物（平齐末端）或HindIII 消化的 λDNA 产物（粘性末端），插入片段和载体的比例为 3:1，使用快速连接试剂盒进行连接。连接产物转化入化学方法制备的大肠杆菌感受态细胞，在 LB-amp 平板上 37℃ 过夜培养。
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