特性
耐热性好
dsDNA 切刻修复
用于 Gibson 组装方法
概述
Taq DNA 连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5´ -磷酸末端和 3´ -羟基末端通过磷酸二酯键相连。该连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对,并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。在 45℃-65℃ 范围内, Taq DNA 连接酶均有活性。
来源
纯化自重组 E. coli 菌株,含有自 Thermus aquaticus HB8 中克隆的连接酶基因。
反应条件
1X Taq DNA 连接酶反应缓冲液
[20 mM Tris-HCl(pH 7.6 @ 25℃),25 mM KAc,10 mM Mg(Ac)2,10 mM DTT,1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100],45℃ 温育。
该酶需 NAD + 作辅因子,在 10X Taq DNA 连接酶缓冲液中已添加 NAD +; 为了延长 NAD+ 的半衰期,缓冲液应于 -70℃ 贮存。
质保声明
Taq DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
单位定义(粘性末端活性单位)
1 单位指 50 μl 反应体系中,45℃ 条件下,15 分钟内能使 50% 的 1 μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
浓度
浓度
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