特性
dsDNA 切刻修复
Okayama 和 Berg cDNA 克隆
概述
催化双链 DNA 粘性末端的 5´ -磷酸和 3´ -羟基形成磷酸二酯键。
来源
纯化自重组 E. coli 菌株,该菌株携带 E. coli DNA 连接酶的编码基因。
反应条件
1X E. coli DNA 连接酶缓冲液
[30 mM Tris-HCl(pH 8.0 @ 25℃),4 mM MgCl2,1 mM DTT,26 μM NAD+,50 μg/ml BSA],最适反应温度为 16℃。
热失活
质保声明
E. coli DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。
单位定义
1 单位指在 20 μl 反应体系中,在 16℃ 反应条件下,30 分钟能使 50% 的经 HindIII 消化的 λDNA 片段 [5´ 端浓度为 0.12 μM(300 μg/ml)] 连接所需的酶量。单位活性检测条件请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com
浓度
注意事项
本酶以 NAD+(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)作为辅因子。
该酶对平末端片段的连接效率极低,平末端的连接请用平末端/TA 连接酶预混液(NEB #M0367)或快速连接试剂盒(NEB #M2200)。
参考文献
关于该酶特性和产品应用的参考文献,请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。