NEBuffer 1.1: 10%
NEBuffer 2.1: 10%
NEBuffer 3.1: <10%
CutSmart Buffer: 100%
CutSmart、重组酶。
CutSmart 缓冲液 + SAM,37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
2,000 units/ml。
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
NmeAlll 需 2 个拷贝的识别序列才能进行切割。因此,只有单一识别位点的 pUC19 不能被切割。NmeAlll 10 倍过量酶切时,仅有不到 50%的 DNA 会被切割。建议消化每 μg DNA,酶量不大于 5 个单位,反应时间不超过 1 小时。
冰浴或 25℃ 温育时,也能有效切割。
即使延时酶切,NmeAlll 也是进行部分酶切形成一种稳定模式。1 单位即被定义为产生这种稳定酶
切产物所需的酶量。
该酶要获得最佳活性需加入 SAM(随酶提供)。
注意:切割位点根据识别位点与剪切位点间 DNA 的序列会发生 1 个碱基对的偏移。在给定序列中,通常只有 1 个识别位点会在反应中占主导。详情请登陆:www.neb-china.com ,www.neb.com。
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