GoodViewTM是本公司最新开发的优于GoldViewTM核酸染料的升级替代品,与GoldViewTM相比,其荧光信号更强,背景更低;与强致癌的EB不同,GoodView毒性较低,使用较安全。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,并且可用于RNA染色。其激发波长分别为268 nm、294 nm和491 nm, 前两者为紫外光,后者为可见光。发射波长在530 nm处产生。
使用方法
将100 ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)在微波炉中融化。
加入5 ul GoodView,轻轻摇匀,避免产生气泡。
冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
电泳完毕使用凝胶成像系统或可见光透射仪观测。若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。
4℃保存,保存期两年。
注意事项
胶厚度不宜超过0.5 cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
加入GoodView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响。
通过凝胶电泳回收DNA片段时,建议使用GoodView染色,在自然光下切割DNA条带,避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤,可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
对皮肤、眼睛有一定的刺激,操作时戴上手套。不小心接触皮肤后应该立刻清洗,并妥善处理废弃物。
GoodView和EB灵敏度检测对比
1. GoodViewTM核酸染料检测
检测模板:5~70 ng λDNA(将λDNA稀释成不同浓度进行检测)。
GoodViewTM核酸染料用量:100 ml琼脂糖胶溶液(浓度1%)微波炉中融化后加入5 μl GoodViewTM染料
2. EB核酸染料的检测
检测模板:5~70 ng λDNA(将λDNA稀释成不同浓度进行检测)。
EB用量:100 ml琼脂糖胶溶液(浓度1%)微波炉中融化后加入5 μl EB(浓度10 mg/ml),使EB工作的终浓度为0.5 ng/μl。
电泳结果显示灵敏度与EB相当
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