产品简介
Exonuclease III是一种核酸外切酶,该酶作用于双链DNA,从3’OH末端方向逐步切去单核苷酸。该酶最适底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此该酶难以切割3'突出末端。3'到5'外切酶活性对底物的消化程度随3'突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端难以被切割。这种特
性可以用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平端或5'突出端),此时Exonuclease III将仅消化一条链。
Exonuclease III的活性部分依赖DNA双螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。此外,该酶也有RNase H、3’-磷酸酶、脱嘌呤/嘧啶(AP)位点特异性核酸内切酶活性。
产品信息
货号 |
14525ES90 / 14525ES96 |
规格 |
5,000 U / 25,000 U |
酶活定义(U) |
以双链DNA为底物在37℃下孵育30 min,生成1 nmol的酸可溶性物所需的酶量定义为1 U |
蛋白纯度 |
≥95% |
蛋白质量 |
32 KDa |
等电点 |
6.68 |
酶储存buffer |
5 mM KPO4、200 mM KCl、1 mM DTT、0.05 mM EDTA、200 µg/ml BSA、50% Glycerol、pH 6.5 @ 25°C |
失活条件 |
70℃,孵育30 min |
组分信息
组分编号 |
组分名称 |
14525ES90 |
14525ES96 |
14525-A |
Exonuclease III (100 U/μL) |
50 μL |
250 μL |
14525-B |
10× Exo III Buffer |
500 μL |
5× 500 μL |
储存条件
-25~-15℃保存,有效期2年。
注意事项
1. Exonuclease III 不能切割硫代磷酸酯键。因此,也可以通过引入一个 α-硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端保护起来,以
进行单向切割。这种特性可以用于对一端为钝化末端(3’突出端),另一端是敏感末端(平端或 5’突出端)的线性DNA分子进行单方向切割;
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
3. 本产品仅用作科研用途。
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