概述

Origami 2 (DE3) pLysS感受态细胞经特殊工艺制作，可用于DNA的化学转化。Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞同时具有氯霉素，链霉素和四环素三种抗生素抗性。

特点

• 1. Origami 2系列感受态细胞是K-12细胞的衍生而来，在TrxB和Gor基因上同时含有突变，这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键，有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。与Origami系列感受态相比，Origami 2系列感受态细胞是卡那敏感的，这使得该菌株能够适用于大多数的Novagen公司的蛋白表达质粒。 2. DE3是溶源性的λDE3，所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。 3. 含有pLysS质粒，pLysS质粒能够产生T7溶菌酶，可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLysS质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLysS质粒的起始复制位点是p15 Origin，这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。

应用

该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。

使用说明

1. 从-80°C冰箱内取出E.coli Origami 2(DE3) pLysS Competent Cells，迅速插入冰盒内，使其溶解。 2. 加入DNA样品轻轻混匀，冰中放置30分钟。 3. 42°C水浴热激45秒，迅速放回冰中放置2分钟左右，注意不要晃动。添加700 μl不含抗生素的无菌培养基，混合均匀。 4. 37°C振荡培养1小时（160~225 rpm），吸取适量体积均匀涂布到含相应抗生素的LB琼脂培养基平板中。37°C正置至液体被吸收，然后倒置过夜培养。

组份

E.coli Origami 2 (DE3) pLysS Competent Cells 5 x 100 μl/10 x 100 μl pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl

技术规格