概述

Rosetta-gami (DE3) pLysS感受态细胞经特殊工艺制作，可用于DNA的化学转化。Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞同时具有氯霉素，卡那，链霉素和四环素四种抗生素抗性。

特点

• Rosetta-gami系列菌株来源于Origami系列宿主菌，该系列菌株的优点除了含有Origami菌株原有的TrxB和Gor基因突变，提高含二硫键正确折叠蛋白的高效表达，同时含有Rosetta系列菌株中含有的真核细胞稀有密码子。该菌株同时集合了Origami (DE3)和Rosetta (DE3)的优点。Rosetta-gami (DE3) pLysS系列菌株含有pRARE质粒，能够提供AUA，AGG，AGA，CUA，CCC和GGA六个真核细胞中的稀有密码子tRNA，能够有效提升真核细胞在大肠杆菌中的蛋白表达水平。

应用

该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。当使用pCDF系列载体时，还需要使用壮观霉素(Spectinomycin)进行筛选。

使用说明

1. 从-80°C冰箱内取出E.coli RosettagamiB(DE3) Competent Cells，迅速插入冰盒内，使其溶解。 2. 加入DNA样品，轻轻混匀，冰中放置30分钟。 3. 42°C水浴热激45秒，迅速放回冰中静置2分钟左右。 4. 添加700 μl 不含抗生素的无菌培养基，混合均匀。 5. 37°C振荡培养1小时（160~225 rpm），5000 rpm离心1分钟，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块，均匀涂布到含所选质粒筛选抗生素的LB培养基上。37°C正置至液体被吸收，然后倒置过夜培养。

组份

E.coli Rosetta-gami (DE3) pLysS Competent Cells 5 x 100 μl/10 x 100 μl pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl

技术规格