Rosetta-gami (DE3) pLysS感受态细胞经特殊工艺制作,可用于DNA的化学转化。Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞同时具有氯霉素,卡那,链霉素和四环素四种抗生素抗性。
该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。当使用pCDF系列载体时,还需要使用壮观霉素(Spectinomycin)进行筛选。
1. 从-80°C冰箱内取出E.coli RosettagamiB(DE3) Competent Cells,迅速插入冰盒内,使其溶解。 2. 加入DNA样品,轻轻混匀,冰中放置30分钟。 3. 42°C水浴热激45秒,迅速放回冰中静置2分钟左右。 4. 添加700 μl 不含抗生素的无菌培养基,混合均匀。 5. 37°C振荡培养1小时(160~225 rpm),5000 rpm离心1分钟,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块,均匀涂布到含所选质粒筛选抗生素的LB培养基上。37°C正置至液体被吸收,然后倒置过夜培养。
E.coli Rosetta-gami (DE3) pLysS Competent Cells 5 x 100 μl/10 x 100 μl pUC19 plasmid (0.1 ng/μl) 10 μl
规格 | 5 x 100 μl/10 x 100 μl |
基因型 | Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[lac+lacIq pro] gor522::Tn10 trxB pLysS RARE (CamR, KanR, StrR, TetR) |
转化效率 | 使用pUC19质粒DNA检测,转化效率高达10^7 cfu/μg DNA以上。 |
保存条件 | 长期储存于-80°C,可保存半年,避免反复冻融。 |
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