ACK 广泛存在于生物体内,催化乙酸和 ATP 生成乙酰磷酸和 ADP,是细菌碳代谢和能量代谢的关键酶,尤其是在古细菌甲烷合成代谢中起着中枢作用。测定原理如下:(1)ACK 催化乙酸钠和 ATP 生成乙酰磷酸和 ADP,(2)丙酮酸激酶催化 ADP 和 PEP 生成 ATP和丙酮酸,(3)乳酸脱氢酶催化丙酮酸和 NADH 生成乳酸和 NAD+,(4)在 340nm 下测定 NADH 氧化生成 NAD+速率,即可反映 ACK 活性。
试验中所需的仪器和试剂:紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/ 96 孔 UV 板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。
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