辅酶 I 包括还原型和氧化型两种形式,在生物氧化中起传递氢的作用。氧化型辅酶 I 又称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)是脱氢酶的辅酶,它在糖酵解,糖异生,三羧酸循环和呼吸链中发挥着不可替代的作用。中间产物会将脱下的氢递给 NAD,使之成为 NADH(还原型辅酶 I)。而 NADH则会作为氢的载体,在呼吸链中通过化学渗透偶联的方式,合成 ATP。NAD(H)在机体内有重要的生理意义,与物质代谢、能量代谢、抗细胞衰老、抗氧化以及一些疾病的发生密切相关。体内辅酶I 含量降低会导致细胞损伤或衰亡。分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NAD+和 NADH,NADH 通过 PMS 的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在 570 nm 下检测吸光值,而 NAD+可被乙醇脱氢酶还原为 NADH,进一步采用 MTT 还原法检测。
试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
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