·所需 5’ 磷酸化 ssDNA 长度短,仅 16 -18 nt,成本低,可用 NEB T4 PNK 进行磷酸化
·向导/靶标序列的选择不受相邻序列限制
·对 ssDNA 和大多数双链 DNA(dsDNA)底物活性较高(在 dsDNA 底物上产生切刻),对 ssRNA 底物也有一定活性
·适用于体外应用
·参考 Tth Argonaute (TtAgo) 实验的优化指南
TtAgo 是一种来自革兰氏阴性嗜热栖热菌(Thermus thermophiles)的原核 argonaute 蛋白,在 5′-磷酸化单链 DNA(16 – 18 nt)指导下,可发挥 DNA 介导的核酸内切酶作用。在二价 Mg2+(或Mn2+)金属离子存在时,该酶具有类 RNase H 活性(见产品使用说明 #1),并在与 DNA 向导链第 10 和 11 个碱基互补的碱基处切割底物。
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