彩色快速凝胶制备试剂盒12.5%

可制50-125块凝胶(可制成 mini 型 0.75mm 厚度凝胶 125 块/pack；可制成 mini 型 1.00mm 厚度凝胶 90 块/pack； 可制成 mini 型 1.50mm 厚度凝胶 50 块/pack；)　

I. 灌制分离胶（以一块0.75/1.00/1.50mm厚的mini胶为例）

1. 参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。

2. 取等体积的分离胶溶液12.5%和分离胶缓冲液，各2 / 2.7 / 4mL，混匀。

3. 向步骤2制备的混合溶液内加入40 / 54 / 80ul的改良型过硫酸铵溶液，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4. 在凝胶模具中灌入步骤3制备的混合溶液，使液面距离短玻璃板上沿约1.5cm即可，然后分离胶溶液上轻轻覆盖上一层水层，使凝胶表面保持平整。

5. 室温静置6-10分钟，待分离胶和水层之间出现清晰界面后，说明胶已凝固。

II. 灌制浓缩胶（以一块0.75/1.00/1.50mm厚的mini胶为例）

1. 去除覆盖在分离胶上的水层。

2. 取等体积的浓缩胶溶液和彩色浓缩胶缓冲液，各0.5 / 0.75 / 1mL，混匀。

3. 向步骤2制备的混合溶液内加入10 / 15 / 20ul的改良型过硫酸铵溶液，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。

4. 将步骤3制备的混合溶液加至分离胶的上层，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。将梳子慢慢插入凝胶内，避免产生气泡。

5. 静置10~15分钟，等待浓缩胶凝固，小心地拔出梳子，用注射器或枪头，吸取电泳缓冲液将加样孔冲洗干净，即可进行常规电泳操作。

1. 蛋白条带的清晰和平直与电泳条件相关，如果需要蛋白条带更加清晰、平直，建议电泳时电压在100-120V之间，如需要加快电泳速度，可增加至150V。

 2. PAGE凝胶的凝聚速度与温度和过硫酸铵的用量密切相关，可通过改变过硫酸铵的用量，控制PAGE凝胶的聚合速度，凝胶聚合过快不利于操作，应根据实际操作情况做适当的调整。

3. 本产品已加入TEMED替代品，如需进一步加速凝胶，可在配制时加入TEMED。

4. 在分离胶上层加纯水时要小心操作，加水时速度不能太快。

5. 彩色浓缩胶缓冲液内含有染料，因染料本身性质，长期静置后会产生沉淀，使用前请轻柔混匀。

6. 本产品凝胶速度快，不需将凝胶模具放在37℃温箱或者空调热风口下，正常室温条件下配制即可。

浓缩胶溶液

80ml

彩色浓缩胶缓冲液

80ml

分离胶溶液12.5%

250ml

分离胶缓冲液

250ml

改良型过硫酸铵溶液

8ml

一次性配胶杯

50个

6% PAGE 凝胶

70-300KD

8% PAGE 凝胶

30-200KD

10% PAGE 凝胶

20-80KD

12.5% PAGE 凝胶

15-60KD

15% PAGE 凝胶

10-45KD