应用领域 | 本产品适用于原代细胞,培养的哺乳动物细胞,动物组织,植物组织,酵母或细菌细胞等裂解物制备过程中蛋白的保护。 |
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使用方法 | 本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液,使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物),混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。根据需要,0.1M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中。待所需的抑制剂添加完毕并混匀后,就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。 |
注意事项 | 1.传统的蛋白酶抑制剂(E-64, AEBSF, bestatin, leupeptin and aprotinin)是不能够抑制某些去泛素化(DUB)蛋白酶(例如ATAXIN-3)的功能的。 2.本产品以DMSO为溶剂,操作时注意防护。 3.本产品使用前室温平衡至溶解。 4.本产品使用前需震荡,以保证各成分均匀。 5.本产品可以适当分装后保存,并应在临使用前添加到裂解液等适当溶液中。 6.如用于检测金属蛋白酶活性,2D电泳以及IMAC,则不宜添加EDTA。 |
结果实例 | 如图:在加入和不加入博士德蛋白酶抑制剂的情况下,利用博士德的组织提取液提取不用小鼠组织的蛋白时,各组织提取液中酶的活性。 |
附加说明 | 广谱蛋白酶抑制剂混合物成分说明: 抑制剂成分 抑制对象 E-64 抑制半胱氨酸蛋白酶,不可逆 AEBSF-HCI 抑制丝氨酸蛋白酶,不可逆 bestatin 抑制氨基肽酶,可逆 leupeptin 抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶,可逆 aprotinin 抑制丝氨酸蛋白酶,不可逆 Pepstatin 抑制天冬门氨酸蛋白酶,可逆 EDTA 抑制金属蛋白酶,可逆 |
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