产品简介：

    GSH和GSSG检测试剂盒(GSH and GSSG Assay Kit)是一种简单易行的可以分别检测出GSH(还原型谷胱甘肽)和GSSG(氧化型谷胱甘肽)含量的检测试剂盒。
    通过谷胱甘肽还原酶把GSSG还原成GSH，而GSH可以和生色底物DTNB反应产生黄色的TNB和GSSG。适当配制反应体系，前后两个反应合并起来后，总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个颜色产生的限速因素，总谷胱甘肽的量就决定了黄色的TNB形成量。从而通过测定A₄₁₂就可以计算出总谷胱甘肽的量。用适当试剂先清除样品中的GSH，然后利用上述反应原理就可以测定出GSSG的含量。用总谷胱甘肽(GSSG+GSH)的量扣除GSSG的含量，就可以计算出GSH的含量。
    本试剂盒的具体反应原理如下：
                
                
    两个反应相合并：
                
    还原型谷胱甘肽是绝大多数活细胞中巯基的主要来源，对于维护蛋白巯基适当的氧化还原状态有重
要作用，并且是动物细胞中关键的抗氧化剂。总谷胱甘肽中通常90-95%为还原型谷胱甘肽。
    本试剂盒可以检测动物组织、血浆、红细胞、和培养细胞或其它适当样品中GSH和GSSG的含量。
    本试剂盒提供了蛋白去除试剂M，可以更加准确地测定出含有蛋白的样品中的GSH和GSSG的量。
    本试剂盒的检测下限为0.5微摩尔/升。一个试剂盒共可以进行100次检测，可以测定100个样品的总
谷胱甘肽或GSSG的含量，或可以测定出50个样品中GSH和GSSG的各自含量。
包装清单：

保存条件：
    NADPH和GSH清除试剂-20℃保存，其余4℃保存，半年有效。GSSG配制成溶液后，需适当分装，-20℃保存至少3个月有效。DTNB溶解于DMSO后，需适当分装，-20℃保存至少3个月有效。蛋白去除试剂M配制成溶液后仅限当天使用。NADPH溶解后，适当分装，-70℃保存。稀释的GSH清除辅助液和GSH清除试剂溶液均须新鲜配制使用。
注意事项：
    本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。特别是DTT、巯基乙醇等含有巯基的试剂会严重干扰本试剂盒的测定，请尽量避免。
    一定要严格控制反应时的温度和反应时间，否则每次都需做标准曲线。
    NADPH等试剂不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。
    蛋白去除试剂M溶液必须新鲜配制并限当日使用。GSH清除试剂也须新鲜稀释后使用。
    蛋白去除试剂M较难溶解，可以通过剧烈votex并适当加热(不超过37℃)以促进溶解。
    谷胱甘肽还原酶配制在接近饱和的硫酸铵溶液中，存放一段时间后容易出现硫酸铵结晶，属正常现
象。室温孵育促进晶体溶解后可继续使用。如果有水分蒸发到管壁上，则需先离心，随后再促进晶体溶解。如果出现盖子未盖紧导致水汽泄漏的情况，则需补加蒸发掉的水量，然后再促进晶体溶解。可在晶体溶解后使用，但不溶解晶体直接使用也可以，此时可以使用的酶的总体积会稍稍减小一些。
    DMSO在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1. 试剂盒的准备工作：
a.  GSSG储备液的配制：在本试剂盒提供的5mg GSSG中加入816微升MilliQ级纯水，溶解并混匀，即为
    GSSG储备液，浓度为10mM。除立即待用部分外，其余GSSG储备液适当分装后-20℃保存。
b.  DTNB储备液的配制：在本试剂盒提供的4.5mg DTNB中加入1.5毫升本试剂盒提供的DMSO，溶解并混
    匀，即为DTNB储备液。除立即待用部分外，其余DTNB储备液适当分装后-20℃保存。
c.  蛋白去除试剂M溶液的配制：称取0.2克蛋白去除试剂M，加入4毫升总谷胱甘肽检测缓冲液，配制成4
    毫升5%的水溶液。蛋白去除试剂M溶液必须新鲜配制并限当天使用。
d.  NADPH储备液的配制：在本试剂盒提供的4mg NADPH中加入100微升MilliQ级纯水，溶解并混匀，即为
    NADPH储备液。除立即待用部分外，其余NADPH储备液适当分装后-70℃保存。
e.  40倍稀释谷胱甘肽还原酶的配制：取1微升谷胱甘肽还原酶，加入39微升总谷胱甘肽检测缓冲液，混
    匀，即成40倍稀释的谷胱甘肽还原酶。
f.  总谷胱甘肽检测工作液的配制：根据待检测的样品数参考下表配制适当量的总谷胱甘肽检测工作
    液，表中三种试剂按比例混合后即为总谷胱甘肽检测工作液。