产品简介：

    过氧化氢酶检测试剂盒(Catalase Assay Kit)是一种简单易行的通过显色反应来检测细胞、组织或其它样品中过氧化氢酶(Catalase)活性的试剂盒。在过氧化氢相对比较充足的情况下，过氧化氢酶可以催化过氧化氢产生水和氧气。残余的过氧化氢在过氧化物酶(Peroxidase)的催化下可以氧化生色底物，产生红色的产物(N-(4-antipyryl)-3-chloro-5-sulfonate-p-benzoquinonemonoimine)，最大吸收波长为520nm。用过氧化氢标准品，制作标准曲线，这样就可以计算出样品中的过氧化氢酶在单位时间单位体积内催化了多少量的过氧化氢转变为水和氧气，从而可以计算出样品中过氧化氢酶的酶活力。
    过氧化氢酶分布非常广泛。在肝脏、肾脏和红细胞中，过氧化氢酶的水平非常高，是清除能导致氧化损伤的过氧化氢的主要场所。
    过氧化氢酶的活性也可以用紫外分光光度计测定A₂₄₀，但蛋白质或其它组份在A₂₄₀附近都有比较强的吸收，会对测定产生严重干扰。因此，用紫外法测定过氧化氢酶的活性，比较适合纯化的过氧化氢酶。本试剂盒通过检测A₅₂₀来测定过氧化物酶催化下由过氧化氢氧化生色底物产生的红色产物，受干扰的因素小，检测灵敏度高，可以检测出低达1U/ml的过氧化氢酶。
    本试剂盒可以检测全血、红细胞裂解产物、血清、组织匀浆产物、细胞裂解产物等生物样品中的过氧化氢酶的活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
包装清单：

保存条件：
    -20℃保存，一年有效。 过氧化氢酶检测缓冲液和过氧化氢酶反应终止液也可以4℃保存。
注意事项：
    待测的过氧化氢酶样品，无论是纯的过氧化氢酶还是细胞或组织裂解产物，在4℃通常可以保存1
周，-70℃可以长期保存，但-20℃保存后过氧化氢酶的活力会显著下降。
    在检测过程中加入过氧化氢酶反应终止液后15分钟内需开始显色反应。
    过氧化氢不太稳定，精确的过氧化氢浓度需参考本说明书中的方法进行测定。
    如需对样品中的过氧化氢酶活力进行精确定量，需自备蛋白浓度测定试剂盒。例如可以选购碧云天
生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/P0012S)测定样品的蛋白浓度。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
 

使用说明：
1. 试剂盒的准备工作：
a.  配制250mM过氧化氢溶液。本试剂盒提供的过氧化氢浓度约为1M。由于过氧化氢不是非常稳定，使用
    前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的过氧化氢用本试剂盒提供的过氧化氢酶检测缓
    冲液稀释100倍，使过氧化氢的浓度约为10mM。测定A₂₄₀。
    过氧化氢浓度(mM)=22.94 X A₂₄₀
    从而计算出本试剂盒提供的过氧化氢的实际浓度。然后再根据实际的过氧化氢浓度配制250mM过氧化
    氢溶液。
b.  配制5mM过氧化氢溶液。根据测定得到的实际过氧化氢浓度配制5mM过氧化氢溶液。
c.  配制显色工作液。在冰浴上溶解显色底物，适当分装后再使用，尽量避免反复冻融。其它试剂放置
    在冰浴上备用。取适当量的过氧化物酶，按照1:1000的比例用显色底物稀释，配制成显色工作液。
    例如取5μl过氧化物酶，加入5ml显色底物，混匀即得到5ml显色工作液。
2. 样品的准备：
    用适当的裂解液裂解细胞或组织(可以使用碧云天生产的Western及IP细胞裂解液(P0013)进行裂解。
    用本试剂盒提供的过氧化氢酶检测缓冲液稀释样品，裂解好的样品至少加入等体积的过氧化氢酶检
    测缓冲液进行稀释。具体的稀释倍数可以参考表1。
    表1