产品简介：

    DEAE-Dextran细胞转染试剂盒(DEAE-Dextran Transfection Kit)是一种适合于把DNA转染到培养的真核细胞中的转染试剂盒。
    关于DEAE-dextran的细胞转染方法早在1968年就有相关论文发表。DEAE-dextran可以促使DNA结合到细胞膜上，然后通过内吞作用(endocytosis)进入细胞。基于DEAE-dextran的细胞转染方法适用于瞬时转染(transient tranfection)，但不适用于筛选稳定表达细胞株。DEAE-dextran在较高浓度作用较长时间会对细胞产生一定毒性。
    目前基于DEAE-dextran的细胞转染方法有两种，一种方法为把DNA和DEAE--dextran混合后加入到细胞中，另一种方法为先用DEAE?-dextran预处理细胞，然后再加入DNA。后一种方法是在前一种方法的基础上经过改进而产生的，对于一些细胞包括Hela、COS、NIH3T3和KB细胞等，后一种方法可以增加细胞对DNA的摄入量，显著改善转染效果。氯喹的加入可以抑制溶酶体对外源DNA的降解，从而提高转染效率。但对于具体的细胞、具体的培养条件，如需获得更加理想的转染效率，必须自行摸索上述各种转染方法，找出优化的转染方法。
    基于DEAE-dextran的细胞转染方法不仅可以转染贴壁细胞，也可以转染悬浮细胞。
    转染效率可以通过转染表达EGFP或其它荧光蛋白的质粒进行快速鉴定。
    关于不同的细胞转染试剂的主要特点和差异方面的比较，以及如何选择适当的细胞转染试剂，可参考碧云天的相关网页：http://www.beyotime.com/transfection.htm。
    对于六孔板而言，一个包装的本转染试剂如使用常规方法可以转染2500个孔，如使用预处理方法可以转染200个孔。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
C0511-1	DEAE-Dextran溶液	20ml
C0511-2	10XPBS	20ml
C0511-3	氯喹溶液	3.5ml
－	说明书	1份

保存条件：
    4℃保存，一年有效。
注意事项：
    使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率。对于质粒，可以使用碧云天生产的质粒大量抽提试剂盒(D0026)进行抽提，以保证获得较高的转染效率。
    转染前细胞必须处于良好的生长状态。
    试剂盒中各试剂均经过无菌处理，可以直接使用。在细胞转染过程中要严格注意无菌操作。
    需自备用于洗涤的PBS或HBSS，以及用于稀释10XPBS的无菌水。
    稀释或配制DEAE-Dextran溶液或DNA的1XPBS可以用试剂盒中提供的10XPBS稀释。
    氯喹溶液对人体有害，请注意适当防护。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1. DEAE-Dextran常规转染方法
   a. 细胞培养(以六孔板为例，其它培养板或培养皿参考六孔板进行操作)：
      在转染前一天(20-24小时)把约20-60万细胞(具体的细胞数量据细胞大小和细胞生长速度而定)
     培养到六孔板内，使第二天细胞能达到约40-70%满。
   b. 混匀试剂盒中各试剂。取适量10XPBS，稀释为1XPBS。37℃预热自备洗涤液(PBS或HBSS)。
   c. 参考下表，对于待转染的六孔板中一个孔的细胞，依次加入适量1XPBS，2μg DNA，以
      及8μl DEAE-Dextran溶液，使最终体积为170μl，用枪轻轻吹打混匀。
      注意：不宜Vortex或离心。