产品简介：

    考马斯亮蓝快速染色液(Commassie Blue Fast Staining Solution)是以考马斯亮蓝G250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白凝胶的快速、高灵敏染色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。本考马斯亮蓝快速染色液是一种无毒，无刺激性气味的高度环保型染色液。普通的常规方法需使用剧毒的甲醇及强刺激性的乙酸，而碧云天生产的考马斯亮蓝快速染色液则采取全新配方，实现了染色时的无毒和无刺激性气味。
    本考马斯亮蓝快速染色液只需一小时或更短时间就可以轻松检测到低达30-100ng的蛋白电泳条带，凝胶后续经去离子水洗涤降低背景后最低可以检测到5-10ng的蛋白条带。
    本试剂盒可以进行高灵敏染色(详细请参考使用说明)，最低可以清晰检测到5-10ng的蛋白电泳条带，参考图1。
         
         
蛋白上样量：10μg 5μg 2μg 1μg 500ng 200ng 100ng 50ng 20ng  10ng  5ng   2ng   1ng
    图1.使用碧云天的考马斯亮蓝快速染色液对不同上样量的BSA蛋白样品用10% SDS-PAGE胶电泳后的两次高灵敏染色结果。参考使用说明，采用了微波炉加热和去离子水脱色过夜，以获得高灵敏染色效果。
    快速染色时，使用本考马斯亮蓝快速染色和常规的考马斯亮蓝染色相比，效果基本一致，参考图2。
         
    图2. 碧云天考马斯亮蓝快速染色液和常规考马斯亮蓝法染色蛋白凝胶的效果对比。常规方法使用碧云天的考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)。蛋白样品为BSA，凝胶为12% SDS-PAGE。考马斯亮蓝快速染色液室温染色1小时，去离子水脱色1小时。
    无需对蛋白和凝胶进行固定，可以不进行脱色，操作更加简单。
    本染色液和质谱分析兼容，即经过本染色液染色的蛋白条带或蛋白点与常规的考马斯亮蓝G250染色一样，可以用于后续的质谱分析。
包装清单：

保存条件：
    4℃避光保存，一年有效。
注意事项：
    本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。
    需自备去离子水。如无去离子水，也可以使用双蒸水。
    如果使用微波炉加热，请特别注意避免沸腾。以免因暴沸而导致凝胶碎裂。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1. 洗涤：去离子水洗涤3次，每次约5min。
   电泳结束后，取胶放入约100ml去离子水中，在侧摆或水平摇床上摇动5分钟，弃液体，再重复两次，
   共洗涤三次。
   注：本洗涤步骤的目的是为了洗去凝胶中的SDS等干扰物质。如果不能充分去除SDS会导致背景较
   高。去离子水洗涤去除凝胶中的杂质时，如果使用经过加热至接近沸腾的去离子水，每次洗涤1-2分
   钟即可。
2. 染色：加入约20ml考马斯亮蓝快速染色液，染色1小时(或15-120分钟)。
   弃去离子水，加入适量的考马斯亮蓝快速染色液(每块大小约8×8厘米的凝胶需使用约20ml)，使染色
   液能盖住凝胶，且液面至少高出三个胶的厚度为宜，室温在侧摆或水平摇床上进行染色。推荐的室温
   (20-25℃)染色时间为1小时，实际染色时间可以根据染色效果自行调整，通常可以在15-120分钟范
   围内进行调整。室温染色超过120分钟通常染色效果不会进一步改善。染色至能看到清晰的目标蛋白
   条带后，弃染色液，加入适量的去离子水，停止染色反应。然后即可拍照记录。
   注：根据蛋白量的多少，蛋白量大的条带在染色后10-30分钟左右会出现，大部分蛋白条带会在1小
   时内出现。如果希望获得染色灵敏度更高的结果或希望加快染色进程，可以把凝胶放置在考马斯亮蓝
   快速染色液中在95-100℃水浴或烘箱中加热或使用微波炉加热。加热至约95-100℃后，在摇床上进
   行染色。染色液稍冷或冷至近室温后可以继续同前进行加热和摇床染色，可以重复2-3次。染色时如
   果把凝胶和染色液一起放置在微波炉中适当加热，可以大大加快染色速度。但加热时宜尽量避免沸
   腾，以免出现因暴沸而导致的凝胶碎裂。
3. 脱色(可选做)：去离子水脱色1小时(或者过夜)。
   如果希望获得更加清晰的蛋白条带，可以加入约100ml去离子水室温洗涤约1小时甚至过夜。通过去离
   子水洗涤可以进一步降低背景，获得更好的染色效果。
   对于去离子水浸泡过夜的已经进行了染色的凝胶，再次进行考马斯亮蓝快速染色液染色和洗涤可以进
   一步改善染色效果，获得更好的考染蛋白条带。
   注：上述的洗涤、染色和脱色时间均适用于0.75-1.5毫米厚的凝胶，对于更厚的凝胶，洗涤、染色
   和脱色的时间均需适当延长。

常见问题：
1. 无染色条带：可能上样量太少，建议电泳时加适当量的BSA等作为阳性对照。
2. 背景太高：可能杂质没有除尽，建议延长最初的去离子水洗涤时间或增加洗涤次数。也可以在完成染
   色后，把凝胶放置在去离子水中在室温进行洗涤。在去离子水中浸泡过夜，通常可以取得较好的脱色
   效果。
3. 染色条带的灵敏度不够理想：可以使用考马斯亮蓝快速染色液进行第二次染色，再次染色可以改善染
   色效果。在加热情况下染色可以显著提高检测灵敏度，另外染色后在室温或4℃用去离子水进行脱色
   也可以显著改善染色的灵敏度。