产品简介：

    SP6 RNA Polymerase，即SP6 RNA聚合酶，是一种高度特异识别SP6启动子序列的DNA依赖的5'→3' RNA聚合酶。SP6 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA SP6启动子下游NTP的掺入，合成与SP6启动子下游的模板DNA互补的RNA。
    特点：SP6 RNA Polymerase可以识别修饰的NTP，例如生物素标记、地高辛标记、荧光素标记的NTP，可以用于各种标记RNA的合成。同时对于SP6启动子有高度的特异性。
    用途：用于RNA合成，合成的RNA可以用于或用作：杂交探针，基因组DNA序列分析，核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay)，反义RNA合成，作为体外翻译的RNA模板，RNA剪接研究的底物，RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用，核酸扩增分析，siRNA、miRNA等小RNA。
    来源：由大肠杆菌表达，表达基因为嗜菌体SP6 RNA Polymerase基因。
    活性定义：37℃60分钟内，催化1nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
    活性检测条件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，6mM MgCl₂，10mM DTT，2mM spermidine，0.5mM NTP，0.6MBq/ml[³H]-ATP，20μg/ml plasmid DNA containing the specific SP6 RNA Polymerase promoter sequence。
    纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。
    酶储存溶液：50mM Tris-HCl(pH8.0)，150mM NaCl，5mM DTT，0.1mg/ml BSA，0.5mM Elugent，50% glycerol。
    Transcription Buffer(5X)：200mM Tris-Cl(pH7.9 at 25℃)，30mM MgCl₂，50mM DTT，50mM NaCl，10mM spermidine。
    失活或抑制：70℃加热10分钟可使SP6 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA也可以使SP6 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的钠、钾或铵盐可以显著抑制SP6 RNA Polymerase的活性。
    SP6的consensus promotersequence如下：
    -15  -10   -5   +1  +5
    ATTTAGGTGACACTATAGAAGNG
包装清单：

保存条件：
    -20℃保存。
注意事项：
    酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
 

使用说明：
1. RNA合成：
a. DNA模板经限制性核酸内切酶酶切线性化。
b. 酚/氯仿抽提DNA，用乙醇沉淀后，溶于适量的无菌去离子水中。本步骤也可以使用适当的DNA纯化试
   剂盒，例如碧云天的DNA纯化试剂盒(D0033)，直接进行纯化，从而免去了酚氯仿抽提和乙醇沉淀这些
   步骤。
c. 参考如下表格设置反应体系：