产品简介：

    BeyoAP Alkaline Phosphatase，即BeyoAP碱性磷酸酶，是一种热敏感的，可以催化DNA、RNA、核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸水解释放5′或3′末端磷酸基团的酶，也可以脱去蛋白质丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基上的磷酸基团。BeyoAP Alkaline Phosphatase是一种新型碱性磷酸酯酶，在碧云天的各种内切酶和PCR缓冲液中可保持100%活性，对于各种类型的DNA 5′末端的去磷酸化均可在37℃孵育10分钟即可完成，并且75℃孵育5分钟即可完全失活。
    经限制性内切酶酶切的质粒5′端带有磷酸基团，在进行基因克隆时为避免质粒自连，可以使用BeyoAP Alkaline Phosphatase去除5′末端磷酸基团。脱去5′末端磷酸基团的质粒不能发生自连。
    特点：快速去磷酸化，只需37℃孵育10分钟即可；快速失活，75℃孵育5分钟即可完全失活；使用方便，在各种内切酶和PCR缓冲液中保持100%活性，可以和质粒DNA的消化同时进行；操作步骤简单，对于5′或3′突出末端、平端等各种DNA的脱磷酸化采用完全相同的操作步骤；可直接用于连接反应，经BeyoAP Alkaline Phosphatase脱磷，并75℃孵育5分钟失活后可直接用于后续的连接反应。
    用途：通过去除载体或DNA片断5′末端的磷酸基团，防止载体或DNA片断自连；质粒DNA的同时内切酶消化和脱磷；通过5′末端脱磷，为5′末端磷酸化放射性标记准备模板；去除DNA、RNA 5′或3′末端的磷酸基团；用于蛋白质丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的去磷酸化。
    来源：大肠杆菌表达，表达基因为一种细菌碱性磷酸酯酶基因。
    酶活性定义：37℃10分钟内，催化1μg 线性化的pUC19 DNA5′末端脱磷所需的酶量定义为一个活力单位。
    纯度：不含DNA外切酶和内切酶，不含RNA酶。
    酶储存溶液：20mM HEPES-NaOH(pH7.4)，1mM MgCl₂，0.1mM ZnCl₂，0.1% Triton X-100，
50%(v/v)glycerol。
    Reaction Buffer(10X)：100mM Tris-HCl(pH8.0 at 37℃)，50mM MgCl₂，1M KCl，0.2% Triton X-100，10mM 2-mercaptoethanol，1mg/ml BSA。
    失活或抑制：75℃加热5分钟可以使BeyoAP Alkaline Phosphatase失活。金属离子螯合剂对BeyoAP Alkaline Phosphatase有抑制作用。
包装清单：

保存条件：
    -20℃保存。
注意事项：
    酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1. 质粒DNA同时进行内切酶消化和5′末端脱磷：
a. 参考如下表格设置去磷酸化反应：