CFDA,SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒是基于 CFDA, SE 对细胞进行示踪及增殖检测的试剂盒

该试剂盒主要工作原理为：CFDA,SE 是一种膜通透性的荧光素染料，本身不具有荧光发光性。 当其透过细胞膜进入活细胞后， 可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（carboxyfluoresceinsuccinimidyl ester,CFSE），后者可发强 烈的绿色荧光，不能穿透细胞膜，能完好的保留在胞内。CFSE 还可自发性并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶 联到细胞蛋白质上，同时过量且未被偶联的 CFDA,SE 通过被动扩散回到细胞外培养基内，被后续清洗步骤所清 除。经 CFDA,SE 标记的非分裂细胞的荧光稳定，稳定标记的时间可达数月，因此适用于细胞群落分析。 CFDA,SE 标记细胞的荧光均一，在细胞分裂增殖过程中，CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光 强度变为亲代细胞的一半，通过流式细胞仪（FL1 通道）根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞，分裂一次 （1/2 的荧光强度），二次（1/4 的荧光强 度），三次（1/8 的荧光强度），以及更多分裂次数的细胞。CFDA， SE 可检测分裂次数多达八次甚至更多。经 CFDA,SE 标 记的细胞可用于体外和体内增殖研究，且具有不会使邻 近细胞染色的功能。 CFDA,SE 最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可用于成纤维细胞，自然杀伤细胞，造血祖细胞等其他细胞的增殖检 测。 CFDA,SE 标记细胞呈绿色荧光，Ex=494nm，Em=521nm，使用流式细胞仪检测时可以采用 FL1 detectionchannel。 CFDA,SE 标记的细胞也可以用荧光显微镜进行观察。可用 488nm 激发波长进行检测。 本品为 CFDA，SE 细胞增殖与示踪检测试剂盒，包含配制 CFDA，SE 储存液所需的溶剂和细胞标记用的染色缓 冲液，简化了实验前期准备工作。CFDA,SE 标记细胞一般 10-15min 即可完成，对于不同细胞，需要自行摸索最 佳标记时间。按照每个样本的荧光探针标记体积为 1mL 计算，本试剂盒两个规格分别可检测 1000 次和 2000 次。