碧云天生产的海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液(Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Cell Lysis Buffer),是一种用于裂解细胞后用于海肾萤光素酶报告基因检测的裂解液。本产品裂解后的细胞样品,可以用于RG062S/M Renilla-Lumi?海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG066S/M Renilla-Lumi? Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG016/RG017海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒。本产品制备的样品不适合用于萤火虫萤光素酶报告基因的检测。
本裂解液兼容的产品列表如下:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
RG016 | 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100次 |
RG017 | 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 1000次 |
RG062S/M | Renilla-Lumi?海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG066S/M | Renilla-Lumi? Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
如果细胞量比较大,例如培养在培养皿或6孔板中时,适合使用本产品先裂解细胞,然后再使用RG062S/M Renilla-Lumi?海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG066S/M Renilla-Lumi? Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒进行检测。
使用RG016/RG017海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒时,如果试剂盒中的裂解液用量不足,可以使用本产品。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
RG129S | 海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10ml |
RG129M | 海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 100ml |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存,至少一年有效。4℃保存至少1个月有效。
注意事项:
本产品裂解后的样品不能直接用于萤火虫萤光素酶报告基因的检测。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 融解本产品并适当混匀,置于冰浴备用。
2. 细胞的裂解和样品的收集:
a. 对于贴壁细胞:吸尽细胞培养液后,参考下表加入适量的海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液;对于悬浮细胞:离心去上清后,参考下表加入适量海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液。
器皿类型 | 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 |
报告基因细胞裂解液(μl/孔) | 100 | 150 | 200 | 300 | 500 |
注:如果萤光素酶的表达水平比较低,可以尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可以最小为100μl。
b. 充分裂解后,10,000-15,000g离心3-5分钟,取上清用于海肾萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
3. 组织的裂解和样品的收集:
a. 对于海肾萤光素酶转基因动物等组织样品的裂解,优先推荐先把组织样品液氮冷冻研磨成粉末后,按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行裂解(例如20mg组织粉末加入200μl海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液进行裂解);也可以按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行匀浆(例如20mg组织加入200μl海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液用玻璃匀浆器或者电动匀浆器进行匀浆)。
b. 充分裂解后,10,000-15,000g离心3-5分钟,取上清用于海肾萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
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