碧云天的InstantView?绿色荧光DNA上样缓冲液(6X, 溴酚蓝) (InstantView? Green Fluorescent DNA Loading Buffer, 6X with Bromophenol Blue)是一种添加了高安全性绿色荧光染料NA-Green (Nucleic Acid Green)的DNA上样缓冲液,用于琼脂糖凝胶电泳时DNA、RNA等核酸样品的荧光染色和上样,核酸的荧光染色可以在与上样缓冲液混合的瞬间完成。
本产品使用便捷,染色上样一步完成:本产品中NA-Green的浓度经过优化,使用时直接加入适量本产品到核酸样品中混匀即可进行上样和电泳,无须在凝胶配制时加入任何核酸染料或者在电泳后进行染色,上样、染色同步进行,使用特别便捷。
本产品安全、灵敏度高、稳定性好:本产品中使用的NA-Green具有安全(致突变性极低且检测不到显著的细胞毒性)、灵敏度高(可检测低至0.6ng的DNA)、稳定性好(热稳定性和光稳定性好)等优点。本产品的灵敏度效果参考图1。
图1. 不同量DNA样品使用本产品的效果图。实际效果会因DNA质量、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本产品可以使用和SYBR Green或EB相同的荧光检测体系:使用本产品染色后在约500nm波长蓝光(也可以使用约260nm紫外光)激发呈现绿色荧光,适用于原先使用SYBR Green或SYBR Gold为核酸染料的凝胶成像和检测系统,例如对人体无害的蓝光灯或蓝光成像仪。对于原来用于EB染料观察的系统,可以考虑选用碧云天的使用NA-Red染料的D0076 InstantView?红色荧光DNA上样缓冲液(6X, 溴酚蓝)或D0081 InstantView?红色荧光DNA上样缓冲液(6X, BeyoRed),但也可以使用本产品。使用本产品并且用EB的紫外检测体系时,检测灵敏度会比使用NA-Red染料的产品低约4-5倍。对于既可以观察EB也可以观察SYBR Green的具有紫外和蓝光两种激发光的凝胶成像系统,则推荐直接使用本产品。
使用本产品时,宜配套使用D0116S/D0118S/D0121S/D0123S InstantView?绿色荧光DNA Ladder系列产品,或者把已有的添加了常规上样缓冲液的DNA ladder和D0153 InstantView?绿色荧光DNA Marker染料(50X)配套使用。本产品和DNA ladder配套使用的效果图参考图2。
图2. 不同长度的PCR产物样品使用本产品,并使用InstantView?绿色荧光DNA Ladder (D0121S)的电泳效果图。
本上样缓冲液以溴酚蓝为指示剂,稀释至1X后比重仍然较大,上样便捷、极易下沉,且颜色清晰可见。溴酚蓝的电泳的位置与200-500bp的DNA的电泳位置相近,在染色观察200-500bp DNA时,溴酚蓝可能对这些DNA片段的观察有一定干扰。如果溴酚蓝对所需要观察的条带有干扰,请使用D0083 InstantView?绿色荧光DNA上样缓冲液(6X, BeyoRed)。
如果待上样的样品的体积为10微升,则每个样品需使用2微升本产品,本产品共可以进行500次或5000次的染色和上样。
包装清单:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0078-1ml | InstantView?绿色荧光DNA上样缓冲液(6X, 溴酚蓝) | 1ml |
D0078-10ml | InstantView?绿色荧光DNA上样缓冲液(6X, 溴酚蓝) | 2ml×5 |
— | 说明书 | 1份 |
保存条件:
4℃避光保存,至少1年有效。长期不使用时,也可以-20℃避光保存。
注意事项:
本产品作为荧光染料须避光保存,但在使用过程中的常规室内光照不会影响其使用效果。
本产品可直接加入DNA样品中进行上样和电泳。电泳之后的琼脂糖凝胶不建议重复使用。
电泳后的凝胶通常直接使用凝胶成像设备进行观察即可。如果发现背景偏高,也可以使用不含核酸酶的水洗涤背景。
本产品不仅可以染色双链DNA,也可染色单链DNA和RNA。
如果观察到条带弥散或者分离不理想,请尝试以下方法:使用新鲜配制的电泳缓冲液、降低核酸的上样量、降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、降低电泳电压一倍以上并延长凝胶电泳时间以改善电泳效果、使用更薄的梳齿等。
本产品兼容常用的电泳缓冲液,例如TAE和TBE。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 配制合适浓度的琼脂糖凝胶。注:不需要添加任何核酸染料。
2. 将本产品适当混匀,然后按照每5微升样品加入1微升本产品,混匀后,直接进行上样和电泳即可。
注:溴酚蓝的电泳的位置与200-500bp的DNA的电泳位置相近,在染色观察200-500bp DNA时,溴酚蓝可能对这些DNA片段的观察有一定干扰。如果溴酚蓝对所需要观察的条带有干扰,请使用D0083 InstantView?绿色荧光DNA上样缓冲液(6X,
BeyoRed)。
3. 电泳后,推荐使用凝胶成像仪进行观察或拍照。
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